肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2008年
3期
224-227
,共4页
郭淦华%段晓明%刘晓宇%曹建国%贺修胜
郭淦華%段曉明%劉曉宇%曹建國%賀脩勝
곽감화%단효명%류효우%조건국%하수성
肝肿瘤%粒细胞巨噬细胞集落刺激因子,重组%转染%生物相容性材料
肝腫瘤%粒細胞巨噬細胞集落刺激因子,重組%轉染%生物相容性材料
간종류%립세포거서세포집락자격인자,중조%전염%생물상용성재료
目的:研究羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)纳米颗粒载体携带人粒-巨噬细胞集落刺激因子(human granulocyte macrophage colony stimulating factor, hGM-CSF)基因转染HepG 2细胞,以及其对细胞生长的影响,为基因修饰的肝癌肿瘤疫苗的临床研究奠定基础.方法:采用MTT法检测HA纳米颗粒载体对HepG 2细胞生长的影响;采用HA纳米颗粒载体转染技术,将携带有hGM-CSF基因的表达质粒导入HepG 2细胞中,G 418筛选抗性细胞,限制性稀释法挑选单克隆;RT-PCR法鉴定hGM-CSF的整合和表达,ELISA法测定细胞培养液中的hGM-CSF分泌量和持续的时间;FCM法分析hGM-CSF基因对HepG 2细胞生长的影响.结果:MTT结果提示HA纳米颗粒混悬液浓度在80 μg/mL以下对HepG 2细胞生长的影响与对照组比较差异无统计学意义.RT-PCR结果显示hGM-CSF基因在HepG 2细胞中已整合并稳定表达.ELISA检测结果显示转入hGM-CSF基因的HepG 2细胞能稳定分泌hGM-CSF,其分泌量为(216.22± 45.78) ng/106 cells每24 h.FCM检测结果则显示hGM-CSF基因不促进细胞凋亡,且对细胞的生长周期无明显影响.结论:HA纳米颗粒载体可以安全地将目的基因hGM-CSF导入HepG 2细胞中且稳定表达,其对细胞的生长无明显影响,为基因修饰的肝癌疫苗的后继研究提供了实验基础.
目的:研究羥基燐灰石(hydroxyapatite,HA)納米顆粒載體攜帶人粒-巨噬細胞集落刺激因子(human granulocyte macrophage colony stimulating factor, hGM-CSF)基因轉染HepG 2細胞,以及其對細胞生長的影響,為基因脩飾的肝癌腫瘤疫苗的臨床研究奠定基礎.方法:採用MTT法檢測HA納米顆粒載體對HepG 2細胞生長的影響;採用HA納米顆粒載體轉染技術,將攜帶有hGM-CSF基因的錶達質粒導入HepG 2細胞中,G 418篩選抗性細胞,限製性稀釋法挑選單剋隆;RT-PCR法鑒定hGM-CSF的整閤和錶達,ELISA法測定細胞培養液中的hGM-CSF分泌量和持續的時間;FCM法分析hGM-CSF基因對HepG 2細胞生長的影響.結果:MTT結果提示HA納米顆粒混懸液濃度在80 μg/mL以下對HepG 2細胞生長的影響與對照組比較差異無統計學意義.RT-PCR結果顯示hGM-CSF基因在HepG 2細胞中已整閤併穩定錶達.ELISA檢測結果顯示轉入hGM-CSF基因的HepG 2細胞能穩定分泌hGM-CSF,其分泌量為(216.22± 45.78) ng/106 cells每24 h.FCM檢測結果則顯示hGM-CSF基因不促進細胞凋亡,且對細胞的生長週期無明顯影響.結論:HA納米顆粒載體可以安全地將目的基因hGM-CSF導入HepG 2細胞中且穩定錶達,其對細胞的生長無明顯影響,為基因脩飾的肝癌疫苗的後繼研究提供瞭實驗基礎.
목적:연구간기린회석(hydroxyapatite,HA)납미과립재체휴대인립-거서세포집락자격인자(human granulocyte macrophage colony stimulating factor, hGM-CSF)기인전염HepG 2세포,이급기대세포생장적영향,위기인수식적간암종류역묘적림상연구전정기출.방법:채용MTT법검측HA납미과립재체대HepG 2세포생장적영향;채용HA납미과립재체전염기술,장휴대유hGM-CSF기인적표체질립도입HepG 2세포중,G 418사선항성세포,한제성희석법도선단극륭;RT-PCR법감정hGM-CSF적정합화표체,ELISA법측정세포배양액중적hGM-CSF분비량화지속적시간;FCM법분석hGM-CSF기인대HepG 2세포생장적영향.결과:MTT결과제시HA납미과립혼현액농도재80 μg/mL이하대HepG 2세포생장적영향여대조조비교차이무통계학의의.RT-PCR결과현시hGM-CSF기인재HepG 2세포중이정합병은정표체.ELISA검측결과현시전입hGM-CSF기인적HepG 2세포능은정분비hGM-CSF,기분비량위(216.22± 45.78) ng/106 cells매24 h.FCM검측결과칙현시hGM-CSF기인불촉진세포조망,차대세포적생장주기무명현영향.결론:HA납미과립재체가이안전지장목적기인hGM-CSF도입HepG 2세포중차은정표체,기대세포적생장무명현영향,위기인수식적간암역묘적후계연구제공료실험기출.
