中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2011年
1期
41-45
,共5页
孙爱民%王海萍%沈玉君%沈玉先%方圣云
孫愛民%王海萍%瀋玉君%瀋玉先%方聖雲
손애민%왕해평%침옥군%침옥선%방골운
冈田酸%胎鼠皮层神经元%tau%过度磷酸化%阿尔采末病%磷酸化位点
岡田痠%胎鼠皮層神經元%tau%過度燐痠化%阿爾採末病%燐痠化位點
강전산%태서피층신경원%tau%과도린산화%아이채말병%린산화위점
目的 观察Ser202/Thr205位点的过度磷酸化tau在神经元中的定位和聚集情况.方法 取孕18 d SD胎鼠皮层神经元进行原代培养,于培养第9天加入冈田酸(okadaic acid,OA)处理12 h以诱导tau蛋白磷酸化;同时用OA诱导SH-SY5Y细胞;观察tau磷酸化后神经元形态的变化;用AT-8抗体免疫荧光染色观察Ser202/Thr205位点磷酸化tau的定位和聚集;同时应用AT-8抗体和Tau-5抗体检测tau蛋白Ser202/Thr205位点的磷酸化水平变化情况.结果 经过Anti-NeuN和Anti-GFAP免疫染色鉴定,孕18 d胎鼠皮层神经元选择性原代培养成功.OA处理12 h以后,Ser202/Thr205位点磷酸化tau的水平明显增加,且出现高分子量的寡聚体;免疫荧光染色发现,Ser202/Thr205位点磷酸化的tau在原代培养神经元的胞质聚集;而OA处理的SH-SY5Y细胞,Ser202/Thr205位点磷酸化的tau却定位于细胞核.同时发现OA处理的原代神经元突起明显减少或消失.结论 OA能够诱导原代培养的胎鼠神经元tau蛋白在Ser202/Thr205位点过度磷酸化,且该磷酸化tau在不同类型或来源的神经元中的定位不同.
目的 觀察Ser202/Thr205位點的過度燐痠化tau在神經元中的定位和聚集情況.方法 取孕18 d SD胎鼠皮層神經元進行原代培養,于培養第9天加入岡田痠(okadaic acid,OA)處理12 h以誘導tau蛋白燐痠化;同時用OA誘導SH-SY5Y細胞;觀察tau燐痠化後神經元形態的變化;用AT-8抗體免疫熒光染色觀察Ser202/Thr205位點燐痠化tau的定位和聚集;同時應用AT-8抗體和Tau-5抗體檢測tau蛋白Ser202/Thr205位點的燐痠化水平變化情況.結果 經過Anti-NeuN和Anti-GFAP免疫染色鑒定,孕18 d胎鼠皮層神經元選擇性原代培養成功.OA處理12 h以後,Ser202/Thr205位點燐痠化tau的水平明顯增加,且齣現高分子量的寡聚體;免疫熒光染色髮現,Ser202/Thr205位點燐痠化的tau在原代培養神經元的胞質聚集;而OA處理的SH-SY5Y細胞,Ser202/Thr205位點燐痠化的tau卻定位于細胞覈.同時髮現OA處理的原代神經元突起明顯減少或消失.結論 OA能夠誘導原代培養的胎鼠神經元tau蛋白在Ser202/Thr205位點過度燐痠化,且該燐痠化tau在不同類型或來源的神經元中的定位不同.
목적 관찰Ser202/Thr205위점적과도린산화tau재신경원중적정위화취집정황.방법 취잉18 d SD태서피층신경원진행원대배양,우배양제9천가입강전산(okadaic acid,OA)처리12 h이유도tau단백린산화;동시용OA유도SH-SY5Y세포;관찰tau린산화후신경원형태적변화;용AT-8항체면역형광염색관찰Ser202/Thr205위점린산화tau적정위화취집;동시응용AT-8항체화Tau-5항체검측tau단백Ser202/Thr205위점적린산화수평변화정황.결과 경과Anti-NeuN화Anti-GFAP면역염색감정,잉18 d태서피층신경원선택성원대배양성공.OA처리12 h이후,Ser202/Thr205위점린산화tau적수평명현증가,차출현고분자량적과취체;면역형광염색발현,Ser202/Thr205위점린산화적tau재원대배양신경원적포질취집;이OA처리적SH-SY5Y세포,Ser202/Thr205위점린산화적tau각정위우세포핵.동시발현OA처리적원대신경원돌기명현감소혹소실.결론 OA능구유도원대배양적태서신경원tau단백재Ser202/Thr205위점과도린산화,차해린산화tau재불동류형혹래원적신경원중적정위불동.
