中国骨质疏松杂志
中國骨質疏鬆雜誌
중국골질소송잡지
CHINESE JOURNAL OF OSTEOPOROSIS
2010年
12期
907-912
,共6页
赵荣兰%彭效祥%李俏俏%窦烨%孙蓓
趙榮蘭%彭效祥%李俏俏%竇燁%孫蓓
조영란%팽효상%리초초%두엽%손배
RANKL%破骨细胞%成骨细胞%IGF-1
RANKL%破骨細胞%成骨細胞%IGF-1
RANKL%파골세포%성골세포%IGF-1
目的 探讨IGF-1对成骨细胞(osteoblast,OB)的促同化作用是否需要破骨细胞(Osteoclast,OC)的协同.方法 体外培养MC3T3小鼠成骨细胞及RAW264.7小鼠单核巨噬细胞,RAW264.7细胞经核因子kB受体活化因子配基(Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)诱导分化为破骨细胞.以50 ng/ml重组人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1)分别干预成骨细胞及分化成熟的破骨细胞,Wstern blotting验证IGF-1受体的活化.以0、10、50、100 ng/ml的rhIGF-1分别干预成骨细胞、破骨细胞及共培养的成、破骨细胞.12 h后终止培养,收集破骨细胞经IGF-1干预后的条件培养基(OC conditioned medium after IGF-1 treatment,OCCM)对另一组新接种的成骨细胞干预12 h.ELISA检测3组成骨细胞培基中骨钙素(bone Gla protein,BGP)、RANKL的含量,Real-time PCR检测成骨细胞中Bgp基因的表达.结果 RANKL诱导培养8 d后RAW264.7细胞形成TRAP阳性,成熟的多核破骨细胞;Wstern blotting检测表明rhIGF-1可有效得使成、破骨细胞中的IGF-1受体发生磷酸化;ELISA与Real-time PCR 测定结果显示,IGF-1直接干预OB时,Bgp基因表达水平和培养基中BGP及RANKL蛋白的含量均与无干预的对照组无明显区别;而OCCM干预及共培养的OB组,当IGF-1初始干预浓度为10 ng/ml时BGP、RANKL含量及Bgp基因的表达水平显著提高,共培养组与OCCM培养组间无明显区别.结论 IGF-1对OB的促同化作用依赖于OC的参与,两种细胞间的联系可能是通过可溶性的细胞因子来完成.
目的 探討IGF-1對成骨細胞(osteoblast,OB)的促同化作用是否需要破骨細胞(Osteoclast,OC)的協同.方法 體外培養MC3T3小鼠成骨細胞及RAW264.7小鼠單覈巨噬細胞,RAW264.7細胞經覈因子kB受體活化因子配基(Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)誘導分化為破骨細胞.以50 ng/ml重組人胰島素樣生長因子-1(rhIGF-1)分彆榦預成骨細胞及分化成熟的破骨細胞,Wstern blotting驗證IGF-1受體的活化.以0、10、50、100 ng/ml的rhIGF-1分彆榦預成骨細胞、破骨細胞及共培養的成、破骨細胞.12 h後終止培養,收集破骨細胞經IGF-1榦預後的條件培養基(OC conditioned medium after IGF-1 treatment,OCCM)對另一組新接種的成骨細胞榦預12 h.ELISA檢測3組成骨細胞培基中骨鈣素(bone Gla protein,BGP)、RANKL的含量,Real-time PCR檢測成骨細胞中Bgp基因的錶達.結果 RANKL誘導培養8 d後RAW264.7細胞形成TRAP暘性,成熟的多覈破骨細胞;Wstern blotting檢測錶明rhIGF-1可有效得使成、破骨細胞中的IGF-1受體髮生燐痠化;ELISA與Real-time PCR 測定結果顯示,IGF-1直接榦預OB時,Bgp基因錶達水平和培養基中BGP及RANKL蛋白的含量均與無榦預的對照組無明顯區彆;而OCCM榦預及共培養的OB組,噹IGF-1初始榦預濃度為10 ng/ml時BGP、RANKL含量及Bgp基因的錶達水平顯著提高,共培養組與OCCM培養組間無明顯區彆.結論 IGF-1對OB的促同化作用依賴于OC的參與,兩種細胞間的聯繫可能是通過可溶性的細胞因子來完成.
목적 탐토IGF-1대성골세포(osteoblast,OB)적촉동화작용시부수요파골세포(Osteoclast,OC)적협동.방법 체외배양MC3T3소서성골세포급RAW264.7소서단핵거서세포,RAW264.7세포경핵인자kB수체활화인자배기(Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)유도분화위파골세포.이50 ng/ml중조인이도소양생장인자-1(rhIGF-1)분별간예성골세포급분화성숙적파골세포,Wstern blotting험증IGF-1수체적활화.이0、10、50、100 ng/ml적rhIGF-1분별간예성골세포、파골세포급공배양적성、파골세포.12 h후종지배양,수집파골세포경IGF-1간예후적조건배양기(OC conditioned medium after IGF-1 treatment,OCCM)대령일조신접충적성골세포간예12 h.ELISA검측3조성골세포배기중골개소(bone Gla protein,BGP)、RANKL적함량,Real-time PCR검측성골세포중Bgp기인적표체.결과 RANKL유도배양8 d후RAW264.7세포형성TRAP양성,성숙적다핵파골세포;Wstern blotting검측표명rhIGF-1가유효득사성、파골세포중적IGF-1수체발생린산화;ELISA여Real-time PCR 측정결과현시,IGF-1직접간예OB시,Bgp기인표체수평화배양기중BGP급RANKL단백적함량균여무간예적대조조무명현구별;이OCCM간예급공배양적OB조,당IGF-1초시간예농도위10 ng/ml시BGP、RANKL함량급Bgp기인적표체수평현저제고,공배양조여OCCM배양조간무명현구별.결론 IGF-1대OB적촉동화작용의뢰우OC적삼여,량충세포간적련계가능시통과가용성적세포인자래완성.
