解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2011年
3期
227-231,235
,共6页
刘树立%张盛%戴顺东%王恩华
劉樹立%張盛%戴順東%王恩華
류수립%장성%대순동%왕은화
肺癌%RNAi%Kaiso%侵袭%增殖%人
肺癌%RNAi%Kaiso%侵襲%增殖%人
폐암%RNAi%Kaiso%침습%증식%인
目的 转录因子Kaiso是BTB/POZ蛋白家族的重要成员,能够调控多种重要的侵袭、增殖相关基因的表达.本研究拟通过shRNA(small hairpin RNA)技术干扰Kaiso蛋白的表达,观察Kaiso对肺癌细胞系增殖和侵袭等生物学行为的影响.方法 运用shRNA重组质粒转染肺癌细胞系LTE和SPC,特异性下调Kaiso的表达,免疫荧光观察核内Kaiso的表达情况,四甲基偶氮唑盐(MTT)和体外基质胶侵袭(Transwell)实验分别检测肺癌细胞系的增殖和侵袭能力,RT-PCR方法检测Kaiso下游靶基因Matrilysin的转录水平.结果 转染shRNA质粒特异性地下调了Kaiso的mRNA和蛋白表达(P<0.05),LTE和SPC细胞核内Kaiso的荧光信号显著减弱甚至消失,肺癌细胞的增殖活性和侵袭能力明显增强,Matrilysin基因的转录水平显著上调.结论 细胞核内Kaiso蛋白的表达下调,通过调控重要靶基因的表达,影响肺癌细胞系的增殖和侵袭能力.
目的 轉錄因子Kaiso是BTB/POZ蛋白傢族的重要成員,能夠調控多種重要的侵襲、增殖相關基因的錶達.本研究擬通過shRNA(small hairpin RNA)技術榦擾Kaiso蛋白的錶達,觀察Kaiso對肺癌細胞繫增殖和侵襲等生物學行為的影響.方法 運用shRNA重組質粒轉染肺癌細胞繫LTE和SPC,特異性下調Kaiso的錶達,免疫熒光觀察覈內Kaiso的錶達情況,四甲基偶氮唑鹽(MTT)和體外基質膠侵襲(Transwell)實驗分彆檢測肺癌細胞繫的增殖和侵襲能力,RT-PCR方法檢測Kaiso下遊靶基因Matrilysin的轉錄水平.結果 轉染shRNA質粒特異性地下調瞭Kaiso的mRNA和蛋白錶達(P<0.05),LTE和SPC細胞覈內Kaiso的熒光信號顯著減弱甚至消失,肺癌細胞的增殖活性和侵襲能力明顯增彊,Matrilysin基因的轉錄水平顯著上調.結論 細胞覈內Kaiso蛋白的錶達下調,通過調控重要靶基因的錶達,影響肺癌細胞繫的增殖和侵襲能力.
목적 전록인자Kaiso시BTB/POZ단백가족적중요성원,능구조공다충중요적침습、증식상관기인적표체.본연구의통과shRNA(small hairpin RNA)기술간우Kaiso단백적표체,관찰Kaiso대폐암세포계증식화침습등생물학행위적영향.방법 운용shRNA중조질립전염폐암세포계LTE화SPC,특이성하조Kaiso적표체,면역형광관찰핵내Kaiso적표체정황,사갑기우담서염(MTT)화체외기질효침습(Transwell)실험분별검측폐암세포계적증식화침습능력,RT-PCR방법검측Kaiso하유파기인Matrilysin적전록수평.결과 전염shRNA질립특이성지하조료Kaiso적mRNA화단백표체(P<0.05),LTE화SPC세포핵내Kaiso적형광신호현저감약심지소실,폐암세포적증식활성화침습능력명현증강,Matrilysin기인적전록수평현저상조.결론 세포핵내Kaiso단백적표체하조,통과조공중요파기인적표체,영향폐암세포계적증식화침습능력.
