基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2011年
12期
1320-1325
,共6页
杨峰%周娅%曹相原%王艳荣%赵建宁%王宁萍
楊峰%週婭%曹相原%王豔榮%趙建寧%王寧萍
양봉%주아%조상원%왕염영%조건저%왕저평
槐定碱%LPS%RAW264. 7细胞%NF-κB
槐定堿%LPS%RAW264. 7細胞%NF-κB
괴정감%LPS%RAW264. 7세포%NF-κB
目的 观察槐定碱对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞IKKβ,IκBα,NF-κB P65及TNF-α表达的影响,探讨其抗内毒素机制.方法 培养RAW264.7巨噬细胞,分为对照组、槐定碱对照组、LPS组及槐定碱干预组.槐定碱干预组加入LPS 100μg/L孵育1h,弃去LPS后加入槐定碱15.63 mg/L,作用5、30、60和120 min,分别获取细胞与培养液.RT-PCR与Western blot分别检测NF-κB等的mRNA与蛋白表达,放免法检测培养液中TNF-α含量.结果 LPS组各时间点IKKβ、pIκBα、NF-κB P65 mRNA和/或蛋白表达及TNF-α含量均显著高于同时间点对照组(P＜0.01),IκBα mRNA低于同时间点对照组(P＜0.01或P＜0.05)；槐定碱干预组以上因子mRNA和/或蛋白表达及TNF-α含量均较同时间点LPS组显著回落(P＜0.01或P＜0.05),而IκBα mRNA则显著升高(P＜0.01或P ＜0.05).结论 槐定碱调控LPS激活的巨噬细胞NF-κB通路IKKβ、IκBα、NF-κB P65等分子的表达,进而抑制下游TNF-α分泌是其抗内毒素作用机制之一.
目的 觀察槐定堿對LPS誘導的RAW264.7巨噬細胞IKKβ,IκBα,NF-κB P65及TNF-α錶達的影響,探討其抗內毒素機製.方法 培養RAW264.7巨噬細胞,分為對照組、槐定堿對照組、LPS組及槐定堿榦預組.槐定堿榦預組加入LPS 100μg/L孵育1h,棄去LPS後加入槐定堿15.63 mg/L,作用5、30、60和120 min,分彆穫取細胞與培養液.RT-PCR與Western blot分彆檢測NF-κB等的mRNA與蛋白錶達,放免法檢測培養液中TNF-α含量.結果 LPS組各時間點IKKβ、pIκBα、NF-κB P65 mRNA和/或蛋白錶達及TNF-α含量均顯著高于同時間點對照組(P＜0.01),IκBα mRNA低于同時間點對照組(P＜0.01或P＜0.05)；槐定堿榦預組以上因子mRNA和/或蛋白錶達及TNF-α含量均較同時間點LPS組顯著迴落(P＜0.01或P＜0.05),而IκBα mRNA則顯著升高(P＜0.01或P ＜0.05).結論 槐定堿調控LPS激活的巨噬細胞NF-κB通路IKKβ、IκBα、NF-κB P65等分子的錶達,進而抑製下遊TNF-α分泌是其抗內毒素作用機製之一.
목적 관찰괴정감대LPS유도적RAW264.7거서세포IKKβ,IκBα,NF-κB P65급TNF-α표체적영향,탐토기항내독소궤제.방법 배양RAW264.7거서세포,분위대조조、괴정감대조조、LPS조급괴정감간예조.괴정감간예조가입LPS 100μg/L부육1h,기거LPS후가입괴정감15.63 mg/L,작용5、30、60화120 min,분별획취세포여배양액.RT-PCR여Western blot분별검측NF-κB등적mRNA여단백표체,방면법검측배양액중TNF-α함량.결과 LPS조각시간점IKKβ、pIκBα、NF-κB P65 mRNA화/혹단백표체급TNF-α함량균현저고우동시간점대조조(P＜0.01),IκBα mRNA저우동시간점대조조(P＜0.01혹P＜0.05)；괴정감간예조이상인자mRNA화/혹단백표체급TNF-α함량균교동시간점LPS조현저회락(P＜0.01혹P＜0.05),이IκBα mRNA칙현저승고(P＜0.01혹P ＜0.05).결론 괴정감조공LPS격활적거서세포NF-κB통로IKKβ、IκBα、NF-κB P65등분자적표체,진이억제하유TNF-α분비시기항내독소작용궤제지일.
