中南林业科技大学学报
中南林業科技大學學報
중남임업과기대학학보
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY OF FORESTRY & TECHNOLOGY
2012年
3期
158-161
,共4页
丁勇%范红波%张高磊%严宇庭%李瑞阳
丁勇%範紅波%張高磊%嚴宇庭%李瑞暘
정용%범홍파%장고뢰%엄우정%리서양
麻疯树%种子%RNA提取%反转录聚合酶链式反应
痳瘋樹%種子%RNA提取%反轉錄聚閤酶鏈式反應
마풍수%충자%RNA제취%반전록취합매련식반응
采用RNAiso Plus法、RNApure Plant Kit法和改良CTAB法分别提取麻疯树种子总RNA,以期筛选适合于麻疯树种子高质量总RNA提取方法.用琼脂糖甲醛变性凝胶电泳检测总RNA的完整性,以紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率.结果表明:RNAiso Plus法提取麻疯树种子总RNA的A260/A280比值为2.030,28S和18S rRNA条带清晰,且前者的亮度约为后者的2倍,无可见的弥散现象,利用该方法提取的总RNA进行RT-PCR,成功克隆获得了麻疯树oleosin基因长603 bp的cDNA序列.证明RNAiso Plus法提取麻疯树种子总RNA可满足后续RT-PCR、RACE-PCR和基因全长克隆等分子生物学研究.
採用RNAiso Plus法、RNApure Plant Kit法和改良CTAB法分彆提取痳瘋樹種子總RNA,以期篩選適閤于痳瘋樹種子高質量總RNA提取方法.用瓊脂糖甲醛變性凝膠電泳檢測總RNA的完整性,以紫外分光光度計檢測總RNA的純度和得率.結果錶明:RNAiso Plus法提取痳瘋樹種子總RNA的A260/A280比值為2.030,28S和18S rRNA條帶清晰,且前者的亮度約為後者的2倍,無可見的瀰散現象,利用該方法提取的總RNA進行RT-PCR,成功剋隆穫得瞭痳瘋樹oleosin基因長603 bp的cDNA序列.證明RNAiso Plus法提取痳瘋樹種子總RNA可滿足後續RT-PCR、RACE-PCR和基因全長剋隆等分子生物學研究.
채용RNAiso Plus법、RNApure Plant Kit법화개량CTAB법분별제취마풍수충자총RNA,이기사선괄합우마풍수충자고질량총RNA제취방법.용경지당갑철변성응효전영검측총RNA적완정성,이자외분광광도계검측총RNA적순도화득솔.결과표명:RNAiso Plus법제취마풍수충자총RNA적A260/A280비치위2.030,28S화18S rRNA조대청석,차전자적량도약위후자적2배,무가견적미산현상,이용해방법제취적총RNA진행RT-PCR,성공극륭획득료마풍수oleosin기인장603 bp적cDNA서렬.증명RNAiso Plus법제취마풍수충자총RNA가만족후속RT-PCR、RACE-PCR화기인전장극륭등분자생물학연구.