生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2012年
4期
60-64
,共5页
胡萝卜软腐欧文氏菌%expI基因%克隆%薄层层析%高效液相色谱
鬍蘿蔔軟腐歐文氏菌%expI基因%剋隆%薄層層析%高效液相色譜
호라복연부구문씨균%expI기인%극륭%박층층석%고효액상색보
用PCR方法从胡萝卜软腐欧文氏菌的基因组DNA中扩增出信号分子合成酶expI基因,将其克隆到大肠杆菌表达载体pET-28α(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达expI基因的重组大肠杆菌BL21(pET28α-expI).重组菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测表达蛋白相对分子质量约为24.8kD,与预期分子量相符.经薄层层析和高效液相色谱分析发现该重组菌产生的信号分子种类为N-3-羰基己酰高丝氨酸内酯和N-己酰高丝氨酸内酯与胡萝卜软腐欧文氏菌产生的一致.
用PCR方法從鬍蘿蔔軟腐歐文氏菌的基因組DNA中擴增齣信號分子閤成酶expI基因,將其剋隆到大腸桿菌錶達載體pET-28α(+)上,轉化大腸桿菌BL21(DE3),穫得高效錶達expI基因的重組大腸桿菌BL21(pET28α-expI).重組菌經IPTG誘導錶達,SDS-PAGE檢測錶達蛋白相對分子質量約為24.8kD,與預期分子量相符.經薄層層析和高效液相色譜分析髮現該重組菌產生的信號分子種類為N-3-羰基己酰高絲氨痠內酯和N-己酰高絲氨痠內酯與鬍蘿蔔軟腐歐文氏菌產生的一緻.
용PCR방법종호라복연부구문씨균적기인조DNA중확증출신호분자합성매expI기인,장기극륭도대장간균표체재체pET-28α(+)상,전화대장간균BL21(DE3),획득고효표체expI기인적중조대장간균BL21(pET28α-expI).중조균경IPTG유도표체,SDS-PAGE검측표체단백상대분자질량약위24.8kD,여예기분자량상부.경박층층석화고효액상색보분석발현해중조균산생적신호분자충류위N-3-탄기기선고사안산내지화N-기선고사안산내지여호라복연부구문씨균산생적일치.
