中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2005年
1期
45-52
,共8页
任明华%王淑静%林雪松%徐建永%陶站华%赵炜明%刘兴汉
任明華%王淑靜%林雪鬆%徐建永%陶站華%趙煒明%劉興漢
임명화%왕숙정%림설송%서건영%도참화%조위명%류흥한
内皮抑素%定点突变%RGD序列%抗肿瘤活性
內皮抑素%定點突變%RGD序列%抗腫瘤活性
내피억소%정점돌변%RGD서렬%항종류활성
内皮抑素是一种内源性的血管生成和肿瘤生长抑制剂.运用定点突变技术对人内皮抑素基因工程菌中的内皮抑素基因进行改造,将内皮抑素中的GRIRGAD改为RGDRGD序列,提高了内皮抑素的抗肿瘤活性.裸鼠体内抑瘤试验发现,野生与诱变内皮抑素的抑瘤率分别为40.66%和51.05%,诱变内皮抑素抑瘤率比野生内皮抑素提高了近11个百分点.病理切片HE染色诱变组肿瘤的血管生成比野生组明显减少,坏死灶增多.免疫组化试验中,诱变组在微血管密度MVD(P＜0.05)、血管内皮生长因子VEGF(P＜0.05)、增殖细胞核抗原PCNA(P＞0.05)三个指标上均比野生组减小.体外细胞实验中,MTT结果表明,野生组内皮抑素半数抑制浓度IC50=185 μg/ml,诱变组内皮抑素IC50=27 μg/ml,诱变组抑瘤活性是野生组的6倍.细胞迁移抑制实验表明,野生组与诱变组内皮抑素均对肿瘤细胞迁移有抑制作用,野生组迁移抑制率为68.95%;诱变组迁移抑制率为89.94%.上述结果说明,内皮抑素除抑制血管生成外,对肿瘤细胞的生长和迁移也有一定的抑制作用.诱变内皮抑素通过RGDRGD序列与整合素结合而提高了抗肿瘤活性.
內皮抑素是一種內源性的血管生成和腫瘤生長抑製劑.運用定點突變技術對人內皮抑素基因工程菌中的內皮抑素基因進行改造,將內皮抑素中的GRIRGAD改為RGDRGD序列,提高瞭內皮抑素的抗腫瘤活性.裸鼠體內抑瘤試驗髮現,野生與誘變內皮抑素的抑瘤率分彆為40.66%和51.05%,誘變內皮抑素抑瘤率比野生內皮抑素提高瞭近11箇百分點.病理切片HE染色誘變組腫瘤的血管生成比野生組明顯減少,壞死竈增多.免疫組化試驗中,誘變組在微血管密度MVD(P＜0.05)、血管內皮生長因子VEGF(P＜0.05)、增殖細胞覈抗原PCNA(P＞0.05)三箇指標上均比野生組減小.體外細胞實驗中,MTT結果錶明,野生組內皮抑素半數抑製濃度IC50=185 μg/ml,誘變組內皮抑素IC50=27 μg/ml,誘變組抑瘤活性是野生組的6倍.細胞遷移抑製實驗錶明,野生組與誘變組內皮抑素均對腫瘤細胞遷移有抑製作用,野生組遷移抑製率為68.95%;誘變組遷移抑製率為89.94%.上述結果說明,內皮抑素除抑製血管生成外,對腫瘤細胞的生長和遷移也有一定的抑製作用.誘變內皮抑素通過RGDRGD序列與整閤素結閤而提高瞭抗腫瘤活性.
내피억소시일충내원성적혈관생성화종류생장억제제.운용정점돌변기술대인내피억소기인공정균중적내피억소기인진행개조,장내피억소중적GRIRGAD개위RGDRGD서렬,제고료내피억소적항종류활성.라서체내억류시험발현,야생여유변내피억소적억류솔분별위40.66%화51.05%,유변내피억소억류솔비야생내피억소제고료근11개백분점.병리절편HE염색유변조종류적혈관생성비야생조명현감소,배사조증다.면역조화시험중,유변조재미혈관밀도MVD(P＜0.05)、혈관내피생장인자VEGF(P＜0.05)、증식세포핵항원PCNA(P＞0.05)삼개지표상균비야생조감소.체외세포실험중,MTT결과표명,야생조내피억소반수억제농도IC50=185 μg/ml,유변조내피억소IC50=27 μg/ml,유변조억류활성시야생조적6배.세포천이억제실험표명,야생조여유변조내피억소균대종류세포천이유억제작용,야생조천이억제솔위68.95%;유변조천이억제솔위89.94%.상술결과설명,내피억소제억제혈관생성외,대종류세포적생장화천이야유일정적억제작용.유변내피억소통과RGDRGD서렬여정합소결합이제고료항종류활성.
