怀化学院学报
懷化學院學報
부화학원학보
JOURNAL OF HUAIHUA TEACHERS COLLEGE
2007年
5期
63-65
,共3页
杨盛清%唐小异%袁仕善%陈海明%尹乐图
楊盛清%唐小異%袁仕善%陳海明%尹樂圖
양성청%당소이%원사선%진해명%윤악도
弓形虫%主要表面抗原1%克隆%表达
弓形蟲%主要錶麵抗原1%剋隆%錶達
궁형충%주요표면항원1%극륭%표체
为构建弓形虫主要表面抗原1(SAG1)的原核重组表达质粒并获得重组表达蛋白,采用聚合酶链反应(PCR) 从弓形虫RH 株基因组DNA中扩增SAG1基因,经克隆和测序后,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21,PCR和双酶切鉴定阳性菌株,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定观察其诱导的抗体应答.结果表明,PCR扩增出SAG1基因的特异片段,获得的阳性克隆序列与Gen Bank中的SAG1基因序列一致,SAG1基因被亚克隆到表达载体pGEX-4T-1,在BL21中表达了SAG1,表达的蛋白能被弓形虫感染兔血清识别.以上结果说明,已成功构建了弓形虫SAG1的重组表达质粒,在大肠杆菌中表达的SAG1具有良好的免疫学活性.
為構建弓形蟲主要錶麵抗原1(SAG1)的原覈重組錶達質粒併穫得重組錶達蛋白,採用聚閤酶鏈反應(PCR) 從弓形蟲RH 株基因組DNA中擴增SAG1基因,經剋隆和測序後,亞剋隆至原覈錶達載體pGEX-4T-1,轉化大腸桿菌BL21,PCR和雙酶切鑒定暘性菌株,錶達產物用SDS-PAGE和Western blot進行鑒定觀察其誘導的抗體應答.結果錶明,PCR擴增齣SAG1基因的特異片段,穫得的暘性剋隆序列與Gen Bank中的SAG1基因序列一緻,SAG1基因被亞剋隆到錶達載體pGEX-4T-1,在BL21中錶達瞭SAG1,錶達的蛋白能被弓形蟲感染兔血清識彆.以上結果說明,已成功構建瞭弓形蟲SAG1的重組錶達質粒,在大腸桿菌中錶達的SAG1具有良好的免疫學活性.
위구건궁형충주요표면항원1(SAG1)적원핵중조표체질립병획득중조표체단백,채용취합매련반응(PCR) 종궁형충RH 주기인조DNA중확증SAG1기인,경극륭화측서후,아극륭지원핵표체재체pGEX-4T-1,전화대장간균BL21,PCR화쌍매절감정양성균주,표체산물용SDS-PAGE화Western blot진행감정관찰기유도적항체응답.결과표명,PCR확증출SAG1기인적특이편단,획득적양성극륭서렬여Gen Bank중적SAG1기인서렬일치,SAG1기인피아극륭도표체재체pGEX-4T-1,재BL21중표체료SAG1,표체적단백능피궁형충감염토혈청식별.이상결과설명,이성공구건료궁형충SAG1적중조표체질립,재대장간균중표체적SAG1구유량호적면역학활성.
