大连医科大学学报
大連醫科大學學報
대련의과대학학보
JOURNAL OF DALIAN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
3期
205-208
,共4页
Qβ噬菌体%A2基因%溶菌性
Qβ噬菌體%A2基因%溶菌性
Qβ서균체%A2기인%용균성
[目的]通过基因重组技术构建Qβ噬菌体A2基因表达载体,并对其生理学活性进行分析.[方法]采用PCR技术从Qβ基因组中扩增A2基因,克隆到pBAD表达载体中构建pBAD A2重组质粒;对重组质粒进行酶切鉴定、DNA测序分析;转化宿主细胞JM109,SDS-PAGE检测Arabinose诱导后A2蛋白的表达;光电比浊法测定大肠杆茵生长曲线鉴定pBAD A2在不同宿主细胞中的溶菌性.[结果]经菌落PCR筛选、序列测定和酶切鉴定证实表达载体pBAD A2构建成功,并在JM109中获得高表达,其表达水平随Arabinose的浓度增加而增高,Arabinose在0.2%时达到高峰.OD660显示pBAD A2具有溶菌性,可快速溶解大肠杆菌JM109、HB101和594,而对BE110没有溶解活性.[结论]构建成功高效表达A2蛋白的重组载体pBADA2,表达的蛋白具有良好的溶菌性,为新型抗菌药物开发奠定了理论和实践基础.
[目的]通過基因重組技術構建Qβ噬菌體A2基因錶達載體,併對其生理學活性進行分析.[方法]採用PCR技術從Qβ基因組中擴增A2基因,剋隆到pBAD錶達載體中構建pBAD A2重組質粒;對重組質粒進行酶切鑒定、DNA測序分析;轉化宿主細胞JM109,SDS-PAGE檢測Arabinose誘導後A2蛋白的錶達;光電比濁法測定大腸桿茵生長麯線鑒定pBAD A2在不同宿主細胞中的溶菌性.[結果]經菌落PCR篩選、序列測定和酶切鑒定證實錶達載體pBAD A2構建成功,併在JM109中穫得高錶達,其錶達水平隨Arabinose的濃度增加而增高,Arabinose在0.2%時達到高峰.OD660顯示pBAD A2具有溶菌性,可快速溶解大腸桿菌JM109、HB101和594,而對BE110沒有溶解活性.[結論]構建成功高效錶達A2蛋白的重組載體pBADA2,錶達的蛋白具有良好的溶菌性,為新型抗菌藥物開髮奠定瞭理論和實踐基礎.
[목적]통과기인중조기술구건Qβ서균체A2기인표체재체,병대기생이학활성진행분석.[방법]채용PCR기술종Qβ기인조중확증A2기인,극륭도pBAD표체재체중구건pBAD A2중조질립;대중조질립진행매절감정、DNA측서분석;전화숙주세포JM109,SDS-PAGE검측Arabinose유도후A2단백적표체;광전비탁법측정대장간인생장곡선감정pBAD A2재불동숙주세포중적용균성.[결과]경균락PCR사선、서렬측정화매절감정증실표체재체pBAD A2구건성공,병재JM109중획득고표체,기표체수평수Arabinose적농도증가이증고,Arabinose재0.2%시체도고봉.OD660현시pBAD A2구유용균성,가쾌속용해대장간균JM109、HB101화594,이대BE110몰유용해활성.[결론]구건성공고효표체A2단백적중조재체pBADA2,표체적단백구유량호적용균성,위신형항균약물개발전정료이론화실천기출.
