生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2008年
8期
954-963
,共10页
冯赛祥%朱磊%罗彪%孙益嵘%王海洪
馮賽祥%硃磊%囉彪%孫益嶸%王海洪
풍새상%주뢰%라표%손익영%왕해홍
细菌脂肪酸合成%脂酰ACP%非变性聚丙烯酰胺凝胶
細菌脂肪痠閤成%脂酰ACP%非變性聚丙烯酰胺凝膠
세균지방산합성%지선ACP%비변성취병희선알응효
PCR扩增大肠杆菌参与脂肪酸合成的7个主要酶基因:fabD、fabG、fabH、fabA、fabA、fabZ、fabB和fabI,并构建相应的表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中分别诱导表达酶蛋白,并使用Ni-NTA琼脂糖纯化到7种酶蛋白.体外添加所需酶蛋白和辅因子,在不使用[2-14C]丙二酸单酰CoA的条件下,成功地实现了脂肪酸合成反应的重建,另外还建立了数个鉴定有关酶蛋白功能的标准反应,并用其鉴定了丙酮丁醇梭菌FabZ的功能.
PCR擴增大腸桿菌參與脂肪痠閤成的7箇主要酶基因:fabD、fabG、fabH、fabA、fabA、fabZ、fabB和fabI,併構建相應的錶達載體,在大腸桿菌BL21(DE3)中分彆誘導錶達酶蛋白,併使用Ni-NTA瓊脂糖純化到7種酶蛋白.體外添加所需酶蛋白和輔因子,在不使用[2-14C]丙二痠單酰CoA的條件下,成功地實現瞭脂肪痠閤成反應的重建,另外還建立瞭數箇鑒定有關酶蛋白功能的標準反應,併用其鑒定瞭丙酮丁醇梭菌FabZ的功能.
PCR확증대장간균삼여지방산합성적7개주요매기인:fabD、fabG、fabH、fabA、fabA、fabZ、fabB화fabI,병구건상응적표체재체,재대장간균BL21(DE3)중분별유도표체매단백,병사용Ni-NTA경지당순화도7충매단백.체외첨가소수매단백화보인자,재불사용[2-14C]병이산단선CoA적조건하,성공지실현료지방산합성반응적중건,령외환건립료수개감정유관매단백공능적표준반응,병용기감정료병동정순사균FabZ적공능.
