CAJ | 학술논문

本研究以鸭瘟病毒感染鸭胚成纤维细胞为材料,围绕影响二维电泳因素进行全面探讨,以建立和优化鸭瘟病毒感染细胞蛋白质组二维电泳模型.结果表明,样品经过冷丙酮处理,水化液DTT浓度为30 mmol/L都有利于等电聚焦;采用PH5～8 IPG窄胶条和混合两性裁体电解质pH3～10/pH5～8为2/1比pH3～10 IPG宽胶条和单一两性载体电解质PH3～10分离蛋白时,各蛋白点间距较大,分辨率高,更有利于显示低丰度蛋白点;1.5 mg的蛋白上样量偏大,2～DE图像出现拖尾和水平条纹,部分相邻高丰度的蛋白重叠,且还掩盖了低丰度蛋白点.PDQuest7.40软件分析显示:17 cm PH5～8 IPG胶条电泳鸭瘟病毒感染细胞蛋白质组,银染可获得1 253个蛋白点,而考染却检测到388个蛋白点;重复试验仍获得清晰、稳定的2-DE图像,同一样本不同时期,考染可获得约348、331个蛋白点,蛋白点匹配率达88%,表明了鸭瘟病毒感染细胞蛋白质组二维电泳模型稳定、分辨率高、重复性好,为鸭瘟病毒蛋白组的进一步研究和新蛋白的发现提供了重要的研究方法.
본연구이압온병독감염압배성섬유세포위재료,위요영향이유전영인소진행전면탐토,이건립화우화압온병독감염세포단백질조이유전영모형.결과표명,양품경과랭병동처리,수화액DTT농도위30 mmol/L도유리우등전취초;채용PH5～8 IPG착효조화혼합량성재체전해질pH3～10/pH5～8위2/1비pH3～10 IPG관효조화단일량성재체전해질PH3～10분리단백시,각단백점간거교대,분변솔고,경유리우현시저봉도단백점;1.5 mg적단백상양량편대,2～DE도상출현타미화수평조문,부분상린고봉도적단백중첩,차환엄개료저봉도단백점.PDQuest7.40연건분석현시:17 cm PH5～8 IPG효조전영압온병독감염세포단백질조,은염가획득1 253개단백점,이고염각검측도388개단백점;중복시험잉획득청석、은정적2-DE도상,동일양본불동시기,고염가획득약348、331개단백점,단백점필배솔체88%,표명료압온병독감염세포단백질조이유전영모형은정、분변솔고、중복성호,위압온병독단백조적진일보연구화신단백적발현제공료중요적연구방법.