检验检疫学刊
檢驗檢疫學刊
검험검역학간
INSPECTION AND QUARANTINE SCIENCE
2009年
3期
9-13
,共5页
张子群%谢晓峰%袁金钱%由轩%徐义刚%单琳琳%宋铭忻
張子群%謝曉峰%袁金錢%由軒%徐義剛%單琳琳%宋銘忻
장자군%사효봉%원금전%유헌%서의강%단림림%송명흔
旋毛虫%实时荧光PCR%检测
鏇毛蟲%實時熒光PCR%檢測
선모충%실시형광PCR%검측
根据旋毛虫隔离种线粒体Ls-rRNA基因序列,设计一对特异性引物及TaqMan MGB探针.以Ls-rRNA阳性重组质粒为模板,建立了旋毛虫实时荧光PCR检测方法.该检测方法对各旋毛虫隔离种具有良好的特异性,而对小鼠、狗和猪正常肌肉组织、猪鞭虫、猪蛔虫、猪钩虫、犬蛔虫等无交叉反应.最小检出量为1.32×102拷贝(10-5条旋毛虫),建立的标准曲线拟合良好,扩增方程Y=-3.43X+19.70,相关系数R2=0.9984,扩增效率为95%.平行检测组内变异系数为1.11%(n=20),同一组不同浓度梯度样本(n=9)间隔30d重复检测,结果无显著性差异.人工感染不同剂量猪旋毛虫的小鼠,在攻虫14d后检出率100%.对经压片镜检、人工胃液消化、胶体金试纸条检测结果为阴性的63份送检狗肉样本中敏感地检出8个阳性.
根據鏇毛蟲隔離種線粒體Ls-rRNA基因序列,設計一對特異性引物及TaqMan MGB探針.以Ls-rRNA暘性重組質粒為模闆,建立瞭鏇毛蟲實時熒光PCR檢測方法.該檢測方法對各鏇毛蟲隔離種具有良好的特異性,而對小鼠、狗和豬正常肌肉組織、豬鞭蟲、豬蛔蟲、豬鉤蟲、犬蛔蟲等無交扠反應.最小檢齣量為1.32×102拷貝(10-5條鏇毛蟲),建立的標準麯線擬閤良好,擴增方程Y=-3.43X+19.70,相關繫數R2=0.9984,擴增效率為95%.平行檢測組內變異繫數為1.11%(n=20),同一組不同濃度梯度樣本(n=9)間隔30d重複檢測,結果無顯著性差異.人工感染不同劑量豬鏇毛蟲的小鼠,在攻蟲14d後檢齣率100%.對經壓片鏡檢、人工胃液消化、膠體金試紙條檢測結果為陰性的63份送檢狗肉樣本中敏感地檢齣8箇暘性.
근거선모충격리충선립체Ls-rRNA기인서렬,설계일대특이성인물급TaqMan MGB탐침.이Ls-rRNA양성중조질립위모판,건립료선모충실시형광PCR검측방법.해검측방법대각선모충격리충구유량호적특이성,이대소서、구화저정상기육조직、저편충、저회충、저구충、견회충등무교차반응.최소검출량위1.32×102고패(10-5조선모충),건립적표준곡선의합량호,확증방정Y=-3.43X+19.70,상관계수R2=0.9984,확증효솔위95%.평행검측조내변이계수위1.11%(n=20),동일조불동농도제도양본(n=9)간격30d중복검측,결과무현저성차이.인공감염불동제량저선모충적소서,재공충14d후검출솔100%.대경압편경검、인공위액소화、효체금시지조검측결과위음성적63빈송검구육양본중민감지검출8개양성.
