上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2010年
2期
140-146
,共7页
严秀蕊%张大生%梁婉琪%王玉炯%张大兵
嚴秀蕊%張大生%樑婉琪%王玉炯%張大兵
엄수예%장대생%량완기%왕옥형%장대병
水稻%OsCP2%原核表达%克隆
水稻%OsCP2%原覈錶達%剋隆
수도%OsCP2%원핵표체%극륭
半胱氨酸蛋白酶是植物体中重要的蛋白水解酶,广泛参与种子萌发、幼苗发育、胁迫响应和组织分化衰老等生理过程.我们对水稻中半胱氨酸蛋白酶基因OsCF2 (Oryza sativa cysteine protease 2)序列进行分析.该基因cDNA全长2 279 bp,由2个外显子和1个内含子组成;包含1个1 089 bp的开放读码框,编码1个含362个氨基酸残基的蛋白,在蛋白氨基端有-36个氨基酸组成的信号肽.生物信息学分析表明,OsCP2与大麦半胱氨酸蛋白酶HvCP同源性最高,同属木瓜蛋白酶亚家族.另外,我们构建了pET32a/CP2原核.表达载体,通过转化大肠杆菌BL21DE3,成功表达了OsCP2重组蛋白.分子量约为58kD;通过纯化包涵体获得了纯度高达90%以上的重组OsCP2蛋白,这为进一步研究该基因的功能提供了基础.
半胱氨痠蛋白酶是植物體中重要的蛋白水解酶,廣汎參與種子萌髮、幼苗髮育、脅迫響應和組織分化衰老等生理過程.我們對水稻中半胱氨痠蛋白酶基因OsCF2 (Oryza sativa cysteine protease 2)序列進行分析.該基因cDNA全長2 279 bp,由2箇外顯子和1箇內含子組成;包含1箇1 089 bp的開放讀碼框,編碼1箇含362箇氨基痠殘基的蛋白,在蛋白氨基耑有-36箇氨基痠組成的信號肽.生物信息學分析錶明,OsCP2與大麥半胱氨痠蛋白酶HvCP同源性最高,同屬木瓜蛋白酶亞傢族.另外,我們構建瞭pET32a/CP2原覈.錶達載體,通過轉化大腸桿菌BL21DE3,成功錶達瞭OsCP2重組蛋白.分子量約為58kD;通過純化包涵體穫得瞭純度高達90%以上的重組OsCP2蛋白,這為進一步研究該基因的功能提供瞭基礎.
반광안산단백매시식물체중중요적단백수해매,엄범삼여충자맹발、유묘발육、협박향응화조직분화쇠로등생리과정.아문대수도중반광안산단백매기인OsCF2 (Oryza sativa cysteine protease 2)서렬진행분석.해기인cDNA전장2 279 bp,유2개외현자화1개내함자조성;포함1개1 089 bp적개방독마광,편마1개함362개안기산잔기적단백,재단백안기단유-36개안기산조성적신호태.생물신식학분석표명,OsCP2여대맥반광안산단백매HvCP동원성최고,동속목과단백매아가족.령외,아문구건료pET32a/CP2원핵.표체재체,통과전화대장간균BL21DE3,성공표체료OsCP2중조단백.분자량약위58kD;통과순화포함체획득료순도고체90%이상적중조OsCP2단백,저위진일보연구해기인적공능제공료기출.
