安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
29期
16243-16244,16255
,共3页
金春梅%张厚双%薛书江%权根花%崔金伟%王兴贵
金春梅%張厚雙%薛書江%權根花%崔金偉%王興貴
금춘매%장후쌍%설서강%권근화%최금위%왕흥귀
弓形虫%AMA1基因%真核表达
弓形蟲%AMA1基因%真覈錶達
궁형충%AMA1기인%진핵표체
[目的]构建弓形虫AMA1基因的真核表达质粒,研究其在体外细胞中的表达情况.[方法]运用PCR方法和克隆技术,构建pcDNA3.1-AMA1重组质粒;利用脂质体介导转染法,将该重组质粒导入HEK-293细胞,用Western blotting法检测其在体外的表达情况.[结果]从弓形虫RH株cDNA中扩增出AMA1基因片段,成功构建重组表达质粒pcDNA3.1-AMA1,转染AMA1基因的HEK-293细胞表达产物经Western blotting鉴定,其分子量约为70 kD,能被特异性免疫血清所识别.[结论]构建的真核表达质粒pcDNA3.1-AMA1能在HEK-293细胞中表达,为下一步弓形虫DNA疫苗的研究奠定了基础.
[目的]構建弓形蟲AMA1基因的真覈錶達質粒,研究其在體外細胞中的錶達情況.[方法]運用PCR方法和剋隆技術,構建pcDNA3.1-AMA1重組質粒;利用脂質體介導轉染法,將該重組質粒導入HEK-293細胞,用Western blotting法檢測其在體外的錶達情況.[結果]從弓形蟲RH株cDNA中擴增齣AMA1基因片段,成功構建重組錶達質粒pcDNA3.1-AMA1,轉染AMA1基因的HEK-293細胞錶達產物經Western blotting鑒定,其分子量約為70 kD,能被特異性免疫血清所識彆.[結論]構建的真覈錶達質粒pcDNA3.1-AMA1能在HEK-293細胞中錶達,為下一步弓形蟲DNA疫苗的研究奠定瞭基礎.
[목적]구건궁형충AMA1기인적진핵표체질립,연구기재체외세포중적표체정황.[방법]운용PCR방법화극륭기술,구건pcDNA3.1-AMA1중조질립;이용지질체개도전염법,장해중조질립도입HEK-293세포,용Western blotting법검측기재체외적표체정황.[결과]종궁형충RH주cDNA중확증출AMA1기인편단,성공구건중조표체질립pcDNA3.1-AMA1,전염AMA1기인적HEK-293세포표체산물경Western blotting감정,기분자량약위70 kD,능피특이성면역혈청소식별.[결론]구건적진핵표체질립pcDNA3.1-AMA1능재HEK-293세포중표체,위하일보궁형충DNA역묘적연구전정료기출.
