中国癌症防治杂志
中國癌癥防治雜誌
중국암증방치잡지
CHINESE JOURNAL OF ONCOLOGY PREVENTION AND TREATMENT
2011年
1期
15-19
,共5页
李蕾%杨帆%匡志鹏%罗小玲%谢裕安%席玮%黎远冬%吴继宁
李蕾%楊帆%劻誌鵬%囉小玲%謝裕安%席瑋%黎遠鼕%吳繼寧
리뢰%양범%광지붕%라소령%사유안%석위%려원동%오계저
蛤蚧蛋白%HepG-2细胞%MTS法%细胞凋亡
蛤蚧蛋白%HepG-2細胞%MTS法%細胞凋亡
합개단백%HepG-2세포%MTS법%세포조망
目的 从蛤蚧组织液中筛选对肝癌HepG-2细胞具有生长抑制作用的蛋白组分,体外研究其抗肿瘤作用及机制.方法 提取蛤蚧蛋白,用sephadexG-50凝胶层析分离出不同分子量的蛤蚧蛋白组分,采用MTS法观察蛤蚧蛋白各组分对肝癌HepG-2细胞的生长抑制作用;Hoechst33342/PI双荧光染色法观察其作用前后的细胞凋亡,并用RT-PCR法检测蛤蚧蛋白组分作用后bax、bcl-2、cmyc和p53基因的表达情况.结果 sephadexG-50凝胶层析可分离出3种分子量不同的蛤蚧蛋白组分,3种蛤蚧蛋白组分都具有不同程度地抑制HepG-2细胞生长的作用,其中分子量为3～20KD的蛤蚧蛋白组分抑制作用最强,且具有剂量依赖性.Hoechst33342/PI双荧光染色法检测显示3～20KD蛤蚧蛋白作用后坏死细胞和凋亡细胞均增加,RT-PCR法检测发现3～20KD蛤蚧蛋白组分作用后c-myc基因mRNA表达水平稍降低,p53基因mRNA表达水平升高,但两者差异均无统计学意义,bax基因mRNA表达水平明显增高,差异有统计学意义,bcl-2基因在蛋白作用前后均无表达.结论 实验提取的蛤蚧蛋白对肝癌HepG-2细胞具有生长抑制作用,分子量3～2KD的蛤蚧蛋白组分抑制作用最强.其作用机制可能为蛤蚧蛋白通过调高肿瘤bax基因mRNA表达水平诱导肝癌HepG-2细胞凋亡.
目的 從蛤蚧組織液中篩選對肝癌HepG-2細胞具有生長抑製作用的蛋白組分,體外研究其抗腫瘤作用及機製.方法 提取蛤蚧蛋白,用sephadexG-50凝膠層析分離齣不同分子量的蛤蚧蛋白組分,採用MTS法觀察蛤蚧蛋白各組分對肝癌HepG-2細胞的生長抑製作用;Hoechst33342/PI雙熒光染色法觀察其作用前後的細胞凋亡,併用RT-PCR法檢測蛤蚧蛋白組分作用後bax、bcl-2、cmyc和p53基因的錶達情況.結果 sephadexG-50凝膠層析可分離齣3種分子量不同的蛤蚧蛋白組分,3種蛤蚧蛋白組分都具有不同程度地抑製HepG-2細胞生長的作用,其中分子量為3～20KD的蛤蚧蛋白組分抑製作用最彊,且具有劑量依賴性.Hoechst33342/PI雙熒光染色法檢測顯示3～20KD蛤蚧蛋白作用後壞死細胞和凋亡細胞均增加,RT-PCR法檢測髮現3～20KD蛤蚧蛋白組分作用後c-myc基因mRNA錶達水平稍降低,p53基因mRNA錶達水平升高,但兩者差異均無統計學意義,bax基因mRNA錶達水平明顯增高,差異有統計學意義,bcl-2基因在蛋白作用前後均無錶達.結論 實驗提取的蛤蚧蛋白對肝癌HepG-2細胞具有生長抑製作用,分子量3～2KD的蛤蚧蛋白組分抑製作用最彊.其作用機製可能為蛤蚧蛋白通過調高腫瘤bax基因mRNA錶達水平誘導肝癌HepG-2細胞凋亡.
목적 종합개조직액중사선대간암HepG-2세포구유생장억제작용적단백조분,체외연구기항종류작용급궤제.방법 제취합개단백,용sephadexG-50응효층석분리출불동분자량적합개단백조분,채용MTS법관찰합개단백각조분대간암HepG-2세포적생장억제작용;Hoechst33342/PI쌍형광염색법관찰기작용전후적세포조망,병용RT-PCR법검측합개단백조분작용후bax、bcl-2、cmyc화p53기인적표체정황.결과 sephadexG-50응효층석가분리출3충분자량불동적합개단백조분,3충합개단백조분도구유불동정도지억제HepG-2세포생장적작용,기중분자량위3～20KD적합개단백조분억제작용최강,차구유제량의뢰성.Hoechst33342/PI쌍형광염색법검측현시3～20KD합개단백작용후배사세포화조망세포균증가,RT-PCR법검측발현3～20KD합개단백조분작용후c-myc기인mRNA표체수평초강저,p53기인mRNA표체수평승고,단량자차이균무통계학의의,bax기인mRNA표체수평명현증고,차이유통계학의의,bcl-2기인재단백작용전후균무표체.결론 실험제취적합개단백대간암HepG-2세포구유생장억제작용,분자량3～2KD적합개단백조분억제작용최강.기작용궤제가능위합개단백통과조고종류bax기인mRNA표체수평유도간암HepG-2세포조망.
