北京大学学报（医学版）
北京大學學報（醫學版）
북경대학학보（의학판）
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2011年
2期
168-172
,共5页
邓暄%赵红珊%彭智%邓唯唯%李娜%郭帅%石太平
鄧暄%趙紅珊%彭智%鄧唯唯%李娜%郭帥%石太平
산훤%조홍산%팽지%산유유%리나%곽수%석태평
C17orf62%基因表达%细胞死亡%聚ADP核糖聚合酶类
C17orf62%基因錶達%細胞死亡%聚ADP覈糖聚閤酶類
C17orf62%기인표체%세포사망%취ADP핵당취합매류
目的:克隆功能未知的人类新基因C17orf62的长编码序列(C17orf62-L),分析其在细胞系中的表达情况,研究其在细胞内定位情况及其对细胞活力的影响.方法:利用GenBank中的数据,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)从人的cDNA文库中克隆C17orf62编码187个氨基酸的长编码序列C17off62-L,运用生物信息学分析其结构特性.通过逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)分析C17orf62在细胞系中的表达情况.经激光共聚焦显微镜观察C17orf62-L的亚细胞定位情况.使用流式细胞检测以及Western blot实验,分析C17orf62-L对细胞活力的影响及其机制.结果:生物信息学分析显示,C17orf62-L具有信号肽切割位点并包含跨膜结构域.RT-PCR证明C17orf62-L在多种细胞系广泛表达;激光共聚焦实验证实,C17orf62-L广泛分布于胞质,并且与高尔基体部分共定位.功能分析发现,C17orf62-L可诱导细胞死亡,且可通过多聚ADP核糖聚合酶(poly ADPribose polymerase,PARP)切割发挥作用.结论:C17orf62是一个新的人类细胞死亡诱导基因.
目的:剋隆功能未知的人類新基因C17orf62的長編碼序列(C17orf62-L),分析其在細胞繫中的錶達情況,研究其在細胞內定位情況及其對細胞活力的影響.方法:利用GenBank中的數據,通過聚閤酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)從人的cDNA文庫中剋隆C17orf62編碼187箇氨基痠的長編碼序列C17off62-L,運用生物信息學分析其結構特性.通過逆轉錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)分析C17orf62在細胞繫中的錶達情況.經激光共聚焦顯微鏡觀察C17orf62-L的亞細胞定位情況.使用流式細胞檢測以及Western blot實驗,分析C17orf62-L對細胞活力的影響及其機製.結果:生物信息學分析顯示,C17orf62-L具有信號肽切割位點併包含跨膜結構域.RT-PCR證明C17orf62-L在多種細胞繫廣汎錶達;激光共聚焦實驗證實,C17orf62-L廣汎分佈于胞質,併且與高爾基體部分共定位.功能分析髮現,C17orf62-L可誘導細胞死亡,且可通過多聚ADP覈糖聚閤酶(poly ADPribose polymerase,PARP)切割髮揮作用.結論:C17orf62是一箇新的人類細胞死亡誘導基因.
목적:극륭공능미지적인류신기인C17orf62적장편마서렬(C17orf62-L),분석기재세포계중적표체정황,연구기재세포내정위정황급기대세포활력적영향.방법:이용GenBank중적수거,통과취합매련반응(polymerase chain reaction,PCR)종인적cDNA문고중극륭C17orf62편마187개안기산적장편마서렬C17off62-L,운용생물신식학분석기결구특성.통과역전록PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)분석C17orf62재세포계중적표체정황.경격광공취초현미경관찰C17orf62-L적아세포정위정황.사용류식세포검측이급Western blot실험,분석C17orf62-L대세포활력적영향급기궤제.결과:생물신식학분석현시,C17orf62-L구유신호태절할위점병포함과막결구역.RT-PCR증명C17orf62-L재다충세포계엄범표체;격광공취초실험증실,C17orf62-L엄범분포우포질,병차여고이기체부분공정위.공능분석발현,C17orf62-L가유도세포사망,차가통과다취ADP핵당취합매(poly ADPribose polymerase,PARP)절할발휘작용.결론:C17orf62시일개신적인류세포사망유도기인.
