武警医学
武警醫學
무경의학
MEDICAL JOURNAL OF THE CHINESE PEOPLE'S ARMED POLICE FORCES
2012年
2期
111-114
,共4页
朱秀丽%朱晓英%郭青玉%王静%温德升%吴军正
硃秀麗%硃曉英%郭青玉%王靜%溫德升%吳軍正
주수려%주효영%곽청옥%왕정%온덕승%오군정
涎腺%腺样囊性癌%短发夹状RNA%真核表达载体%基质金属蛋白酶1
涎腺%腺樣囊性癌%短髮夾狀RNA%真覈錶達載體%基質金屬蛋白酶1
연선%선양낭성암%단발협상RNA%진핵표체재체%기질금속단백매1
目的 构建基质金属蛋白酶-1(MMP-1)特异的RNA干扰质粒载体.方法 根据GenBank 数据库提供的MMP-1基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA (Short hairpin RNAs,shRNA) 的DNA 序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法 进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-MMP1)稳定转染至人腺样囊性癌ACC-M细胞系后,应用RT-PCR、免疫组织化学及Western Blot对细胞MMP1的表达进行检测.结果 在成功转染pWH1-ACC-M表达载体的ACC-M细胞中,MMP1 mRNA和蛋白的表达明显降低.结论 成功构建了MMP1特异性shRNA表达载体,可有效地沉默MMP1基因,为进一步研究MMP1表达与腺样囊性癌增殖和转移的相关性奠定了一定的实验基础.
目的 構建基質金屬蛋白酶-1(MMP-1)特異的RNA榦擾質粒載體.方法 根據GenBank 數據庫提供的MMP-1基因覈苷痠序列,選擇設計能轉錄短髮夾狀RNA (Short hairpin RNAs,shRNA) 的DNA 序列,併與pWH1質粒載體連接,用酶切的方法 進行鑒定;將構建成功的特異性錶達載體(pWH1-MMP1)穩定轉染至人腺樣囊性癌ACC-M細胞繫後,應用RT-PCR、免疫組織化學及Western Blot對細胞MMP1的錶達進行檢測.結果 在成功轉染pWH1-ACC-M錶達載體的ACC-M細胞中,MMP1 mRNA和蛋白的錶達明顯降低.結論 成功構建瞭MMP1特異性shRNA錶達載體,可有效地沉默MMP1基因,為進一步研究MMP1錶達與腺樣囊性癌增殖和轉移的相關性奠定瞭一定的實驗基礎.
목적 구건기질금속단백매-1(MMP-1)특이적RNA간우질립재체.방법 근거GenBank 수거고제공적MMP-1기인핵감산서렬,선택설계능전록단발협상RNA (Short hairpin RNAs,shRNA) 적DNA 서렬,병여pWH1질립재체련접,용매절적방법 진행감정;장구건성공적특이성표체재체(pWH1-MMP1)은정전염지인선양낭성암ACC-M세포계후,응용RT-PCR、면역조직화학급Western Blot대세포MMP1적표체진행검측.결과 재성공전염pWH1-ACC-M표체재체적ACC-M세포중,MMP1 mRNA화단백적표체명현강저.결론 성공구건료MMP1특이성shRNA표체재체,가유효지침묵MMP1기인,위진일보연구MMP1표체여선양낭성암증식화전이적상관성전정료일정적실험기출.
