中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2012年
14期
2975-2978
,共4页
彭雪华%龙志敏%骆世芳%贺桂琼
彭雪華%龍誌敏%駱世芳%賀桂瓊
팽설화%룡지민%락세방%하계경
溶酶体酶抑制剂%Nicastrin%神经细胞%蛋白降解
溶酶體酶抑製劑%Nicastrin%神經細胞%蛋白降解
용매체매억제제%Nicastrin%신경세포%단백강해
目的 探讨溶酶体酶抑制剂对阿尔茨海默病(AD)相关蛋白Nicastrin(NCT)表达的影响,以期明确NCT的蛋白降解是否与溶酶体途径有关.方法 在用人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y建立稳定表达NCT细胞株的基础上,应用溶酶体酶抑制剂处理NCT细胞株,并结合Western印迹、亚细胞器的分级分离、免疫荧光双标等技术,检测溶酶体酶抑制剂处理后神经细胞内NCT的表达变化.结果 亚细胞器分级分离实验显示,正常情况下神经细胞内的NCT主要分布于内质网和高尔基复合体,少量NCT分布于溶酶体.Western印迹结果显示,溶酶体酶抑制剂处理后,神经细胞内源性和外源性成熟NCT(mNCT)的表达显著增强,且溶酶体酶抑制剂氯喹对mNCT蛋白表达的增强效应呈剂量依赖性和时间依赖性,但溶酶体抑制剂对非成熟NCT(imNCT)的表达无影响；免疫荧光双标结果显示,溶酶体酶抑制剂处理后,细胞内NCT的表达增强,且增多的NCT主要聚集在溶酶体内.结论 神经细胞内mNCT的降解与溶酶体途径有关.
目的 探討溶酶體酶抑製劑對阿爾茨海默病(AD)相關蛋白Nicastrin(NCT)錶達的影響,以期明確NCT的蛋白降解是否與溶酶體途徑有關.方法 在用人神經母細胞瘤細胞SH-SY5Y建立穩定錶達NCT細胞株的基礎上,應用溶酶體酶抑製劑處理NCT細胞株,併結閤Western印跡、亞細胞器的分級分離、免疫熒光雙標等技術,檢測溶酶體酶抑製劑處理後神經細胞內NCT的錶達變化.結果 亞細胞器分級分離實驗顯示,正常情況下神經細胞內的NCT主要分佈于內質網和高爾基複閤體,少量NCT分佈于溶酶體.Western印跡結果顯示,溶酶體酶抑製劑處理後,神經細胞內源性和外源性成熟NCT(mNCT)的錶達顯著增彊,且溶酶體酶抑製劑氯喹對mNCT蛋白錶達的增彊效應呈劑量依賴性和時間依賴性,但溶酶體抑製劑對非成熟NCT(imNCT)的錶達無影響；免疫熒光雙標結果顯示,溶酶體酶抑製劑處理後,細胞內NCT的錶達增彊,且增多的NCT主要聚集在溶酶體內.結論 神經細胞內mNCT的降解與溶酶體途徑有關.
목적 탐토용매체매억제제대아이자해묵병(AD)상관단백Nicastrin(NCT)표체적영향,이기명학NCT적단백강해시부여용매체도경유관.방법 재용인신경모세포류세포SH-SY5Y건립은정표체NCT세포주적기출상,응용용매체매억제제처리NCT세포주,병결합Western인적、아세포기적분급분리、면역형광쌍표등기술,검측용매체매억제제처리후신경세포내NCT적표체변화.결과 아세포기분급분리실험현시,정상정황하신경세포내적NCT주요분포우내질망화고이기복합체,소량NCT분포우용매체.Western인적결과현시,용매체매억제제처리후,신경세포내원성화외원성성숙NCT(mNCT)적표체현저증강,차용매체매억제제록규대mNCT단백표체적증강효응정제량의뢰성화시간의뢰성,단용매체억제제대비성숙NCT(imNCT)적표체무영향；면역형광쌍표결과현시,용매체매억제제처리후,세포내NCT적표체증강,차증다적NCT주요취집재용매체내.결론 신경세포내mNCT적강해여용매체도경유관.
