基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2004年
5期
552-555
,共4页
赵丽云%叶铁虎%张银中%卜玉芬%任洪智%黄宇光
趙麗雲%葉鐵虎%張銀中%蔔玉芬%任洪智%黃宇光
조려운%협철호%장은중%복옥분%임홍지%황우광
吗啡%中性粒细胞%NF-κB%炎症反应
嗎啡%中性粒細胞%NF-κB%炎癥反應
마배%중성립세포%NF-κB%염증반응
观察吗啡对中性粒细胞NF-κB亚单位p65及其抑制蛋白I-κB mRNA表达、p65蛋白含量的影响.分离提取20例健康人外周血中性粒细胞,以RPMI1640培养液悬浮细胞,将细胞按照每孔1×106个置入培养板.每份细胞分为正常对照组、TNF-α组(20 μg/L)、吗啡组(50 nmol/L)、芬太尼组(100 nmol/L)、丁丙诺啡组(2 nmol/L)、吗啡50 nmol/L+TNF-α 20 μg/L组和芬太尼100 nmol/L+TNF-α 20 μg/L 组、丁丙诺啡2 nmol/L+TNF-α 20 μg/L组.置CO2孵箱孵育3 h后提取细胞总RNA,采用RT-PCR方法检测中性粒细胞NF-κB亚单位p65及其抑制蛋白I-κB mRNA表达;采用免疫蛋白印迹法(Western blot)测定p65蛋白含量.结果示TNF-α组p65 mRNA表达明显增强,约增加31.3%(P＜0.01),而I-κB mRNA的表达减弱约12.6%(P＜0.05).单纯吗啡组及吗啡+TNF-α组对p65 mRNA的表达均显示出抑制作用,且吗啡对I-κB mRNA的表达有增加趋势(P＜0.05).芬太尼组、丁丙诺啡组及加TNF-α刺激后p65及I-κBmRNA的表达均无影响(P＜0.05);Western blot结果亦显示吗啡明显降低p65蛋白含量(P＜0.05),而芬太尼和丁丙诺啡则无效果.结果提示,吗啡具有抑制中性粒细胞 NF-κB激活的作用.
觀察嗎啡對中性粒細胞NF-κB亞單位p65及其抑製蛋白I-κB mRNA錶達、p65蛋白含量的影響.分離提取20例健康人外週血中性粒細胞,以RPMI1640培養液懸浮細胞,將細胞按照每孔1×106箇置入培養闆.每份細胞分為正常對照組、TNF-α組(20 μg/L)、嗎啡組(50 nmol/L)、芬太尼組(100 nmol/L)、丁丙諾啡組(2 nmol/L)、嗎啡50 nmol/L+TNF-α 20 μg/L組和芬太尼100 nmol/L+TNF-α 20 μg/L 組、丁丙諾啡2 nmol/L+TNF-α 20 μg/L組.置CO2孵箱孵育3 h後提取細胞總RNA,採用RT-PCR方法檢測中性粒細胞NF-κB亞單位p65及其抑製蛋白I-κB mRNA錶達;採用免疫蛋白印跡法(Western blot)測定p65蛋白含量.結果示TNF-α組p65 mRNA錶達明顯增彊,約增加31.3%(P＜0.01),而I-κB mRNA的錶達減弱約12.6%(P＜0.05).單純嗎啡組及嗎啡+TNF-α組對p65 mRNA的錶達均顯示齣抑製作用,且嗎啡對I-κB mRNA的錶達有增加趨勢(P＜0.05).芬太尼組、丁丙諾啡組及加TNF-α刺激後p65及I-κBmRNA的錶達均無影響(P＜0.05);Western blot結果亦顯示嗎啡明顯降低p65蛋白含量(P＜0.05),而芬太尼和丁丙諾啡則無效果.結果提示,嗎啡具有抑製中性粒細胞 NF-κB激活的作用.
관찰마배대중성립세포NF-κB아단위p65급기억제단백I-κB mRNA표체、p65단백함량적영향.분리제취20례건강인외주혈중성립세포,이RPMI1640배양액현부세포,장세포안조매공1×106개치입배양판.매빈세포분위정상대조조、TNF-α조(20 μg/L)、마배조(50 nmol/L)、분태니조(100 nmol/L)、정병낙배조(2 nmol/L)、마배50 nmol/L+TNF-α 20 μg/L조화분태니100 nmol/L+TNF-α 20 μg/L 조、정병낙배2 nmol/L+TNF-α 20 μg/L조.치CO2부상부육3 h후제취세포총RNA,채용RT-PCR방법검측중성립세포NF-κB아단위p65급기억제단백I-κB mRNA표체;채용면역단백인적법(Western blot)측정p65단백함량.결과시TNF-α조p65 mRNA표체명현증강,약증가31.3%(P＜0.01),이I-κB mRNA적표체감약약12.6%(P＜0.05).단순마배조급마배+TNF-α조대p65 mRNA적표체균현시출억제작용,차마배대I-κB mRNA적표체유증가추세(P＜0.05).분태니조、정병낙배조급가TNF-α자격후p65급I-κBmRNA적표체균무영향(P＜0.05);Western blot결과역현시마배명현강저p65단백함량(P＜0.05),이분태니화정병낙배칙무효과.결과제시,마배구유억제중성립세포 NF-κB격활적작용.
