第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
7期
840-843
,共4页
袁进%安靓%顾为望%黄吴健
袁進%安靚%顧為望%黃吳健
원진%안정%고위망%황오건
体内原位电穿孔%雄性SPFKM小鼠%睾丸损伤
體內原位電穿孔%雄性SPFKM小鼠%睪汍損傷
체내원위전천공%웅성SPFKM소서%고환손상
目的利用电穿孔仪对成年雄性SPF KM小鼠睾丸进行电穿孔实验,以观察电穿孔对成年雄性SPF KM小鼠睾丸的损伤,为体内精子介导基因转移提供依据.方法设置高压和低压两组不同的体内电穿孔参数,将SPFKM小鼠睾丸置于电穿孔仪上的钳型电极的两侧进行体内电穿孔,2周后处死动物,分离睾丸和附睾,将睾丸称重后用4%多聚甲醛固定,常规组织切片和HE染色,显微镜下观察;将附睾置于M16培养基中分离其中精子,稀释后置显微镜下观察.结果(1)高压电穿孔2周后,附睾精子活力检查和睾丸组织切片镜下观察显示:高压电穿孔可造成睾丸的不可逆损伤;其睾丸质量也显著低于对照组睾丸质量(P<.01).(2)低压电穿孔2周后,附睾精子活力检查和睾丸组织切片镜下观察显示:低压电穿孔虽可造成睾丸一定的损伤,但这种损伤是可逆的,经过一段时间的恢复后雄鼠仍具有生殖能力.并且电穿孔后的睾丸质量与对照组睾丸质量不存在显著差异(P>0.05).结论合理地设计体内电穿孔参数,一方面不会对SPFKM雄鼠睾丸的生殖能力造成严重影响,另一方面它还可为外源基因导入到生殖细胞提供了一种可能.
目的利用電穿孔儀對成年雄性SPF KM小鼠睪汍進行電穿孔實驗,以觀察電穿孔對成年雄性SPF KM小鼠睪汍的損傷,為體內精子介導基因轉移提供依據.方法設置高壓和低壓兩組不同的體內電穿孔參數,將SPFKM小鼠睪汍置于電穿孔儀上的鉗型電極的兩側進行體內電穿孔,2週後處死動物,分離睪汍和附睪,將睪汍稱重後用4%多聚甲醛固定,常規組織切片和HE染色,顯微鏡下觀察;將附睪置于M16培養基中分離其中精子,稀釋後置顯微鏡下觀察.結果(1)高壓電穿孔2週後,附睪精子活力檢查和睪汍組織切片鏡下觀察顯示:高壓電穿孔可造成睪汍的不可逆損傷;其睪汍質量也顯著低于對照組睪汍質量(P<.01).(2)低壓電穿孔2週後,附睪精子活力檢查和睪汍組織切片鏡下觀察顯示:低壓電穿孔雖可造成睪汍一定的損傷,但這種損傷是可逆的,經過一段時間的恢複後雄鼠仍具有生殖能力.併且電穿孔後的睪汍質量與對照組睪汍質量不存在顯著差異(P>0.05).結論閤理地設計體內電穿孔參數,一方麵不會對SPFKM雄鼠睪汍的生殖能力造成嚴重影響,另一方麵它還可為外源基因導入到生殖細胞提供瞭一種可能.
목적이용전천공의대성년웅성SPF KM소서고환진행전천공실험,이관찰전천공대성년웅성SPF KM소서고환적손상,위체내정자개도기인전이제공의거.방법설치고압화저압량조불동적체내전천공삼수,장SPFKM소서고환치우전천공의상적겸형전겁적량측진행체내전천공,2주후처사동물,분리고환화부고,장고환칭중후용4%다취갑철고정,상규조직절편화HE염색,현미경하관찰;장부고치우M16배양기중분리기중정자,희석후치현미경하관찰.결과(1)고압전천공2주후,부고정자활력검사화고환조직절편경하관찰현시:고압전천공가조성고환적불가역손상;기고환질량야현저저우대조조고환질량(P<.01).(2)저압전천공2주후,부고정자활력검사화고환조직절편경하관찰현시:저압전천공수가조성고환일정적손상,단저충손상시가역적,경과일단시간적회복후웅서잉구유생식능력.병차전천공후적고환질량여대조조고환질량불존재현저차이(P>0.05).결론합리지설계체내전천공삼수,일방면불회대SPFKM웅서고환적생식능력조성엄중영향,령일방면타환가위외원기인도입도생식세포제공료일충가능.