中南大学学报(医学版)
中南大學學報(醫學版)
중남대학학보(의학판)
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2008年
4期
331-337
,共7页
刘惠宁%蔡净亭%林秋华%何可人%余蓉
劉惠寧%蔡淨亭%林鞦華%何可人%餘蓉
류혜저%채정정%림추화%하가인%여용
人绒毛膜癌%caveolin-1%RNA干扰%siRNA%侵袭
人絨毛膜癌%caveolin-1%RNA榦擾%siRNA%侵襲
인융모막암%caveolin-1%RNA간우%siRNA%침습
目的:探讨小窝蛋白-1(caveolin-1,CAV-1)的表达与绒毛膜癌高侵袭力之间的相关性,并了解RNA干扰沉默CAV-1基因对高侵袭力绒毛膜癌JEG-3细胞侵袭力的抑制作用.方法:(1)应用Matrigel体外侵袭试验和噻唑盐比色实验[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumro-mide,MTT]检测绒毛膜癌JEG-3细胞和JAR细胞之间侵袭能力和增殖能力的差异;(2)应用半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transeriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测CAV-1 mRNA在人正常早孕绒毛组织、不同侵袭力人绒毛膜癌细胞株JEG-3及JAR表达的差异;(3)将CAV-1小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染至高侵袭力绒毛膜癌JEG-3细胞后,采用RT-PCR检测转染后JEG-3细胞CAV-1 mRNA表达的变化,并应用Matrigel体外侵袭试验和MTT法检测JEG-3细胞侵袭和增殖能力的变化.结果:(1)JEG-3细胞的侵袭能力显著高于JAR细胞(P<0.05),但JEG-3和JAR细胞之间增殖能力的差异无统计学意义(P>0.05);(2)RT-PCR结果显示在人正常早孕绒毛组织、高侵袭性JEG-3细胞以及低侵袭性JAR细胞中均可检测到GAV-1 mRNA,将上述三者中CAV-1 mRNA的表达量进行两两比较,发现人绒毛膜癌细胞株中CAV-1 mRNA的表达明显高于人正常早孕绒毛组织,而具有高侵袭性JEG-3细胞中CAV-1 mRNA的表达明显高于JAR细胞,差异具有统计学意义(P<0.05),相关性分析显示CAV-1表达水平与绒毛膜癌细胞侵袭力呈正相关(r=0.86,P<0.05);(3)CAV-1 siRNA可有效抑制CAV-1 mRNA的表达,并削弱绒毛膜癌细胞的侵袭和增殖能力.结论:CAV-1基因表达可显著增强绒毛膜癌细胞的侵袭潜能,CAV-1 siRNA可抑制绒毛膜癌细胞的侵袭和增殖能力.
目的:探討小窩蛋白-1(caveolin-1,CAV-1)的錶達與絨毛膜癌高侵襲力之間的相關性,併瞭解RNA榦擾沉默CAV-1基因對高侵襲力絨毛膜癌JEG-3細胞侵襲力的抑製作用.方法:(1)應用Matrigel體外侵襲試驗和噻唑鹽比色實驗[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumro-mide,MTT]檢測絨毛膜癌JEG-3細胞和JAR細胞之間侵襲能力和增殖能力的差異;(2)應用半定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(reverse transeriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)方法檢測CAV-1 mRNA在人正常早孕絨毛組織、不同侵襲力人絨毛膜癌細胞株JEG-3及JAR錶達的差異;(3)將CAV-1小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)轉染至高侵襲力絨毛膜癌JEG-3細胞後,採用RT-PCR檢測轉染後JEG-3細胞CAV-1 mRNA錶達的變化,併應用Matrigel體外侵襲試驗和MTT法檢測JEG-3細胞侵襲和增殖能力的變化.結果:(1)JEG-3細胞的侵襲能力顯著高于JAR細胞(P<0.05),但JEG-3和JAR細胞之間增殖能力的差異無統計學意義(P>0.05);(2)RT-PCR結果顯示在人正常早孕絨毛組織、高侵襲性JEG-3細胞以及低侵襲性JAR細胞中均可檢測到GAV-1 mRNA,將上述三者中CAV-1 mRNA的錶達量進行兩兩比較,髮現人絨毛膜癌細胞株中CAV-1 mRNA的錶達明顯高于人正常早孕絨毛組織,而具有高侵襲性JEG-3細胞中CAV-1 mRNA的錶達明顯高于JAR細胞,差異具有統計學意義(P<0.05),相關性分析顯示CAV-1錶達水平與絨毛膜癌細胞侵襲力呈正相關(r=0.86,P<0.05);(3)CAV-1 siRNA可有效抑製CAV-1 mRNA的錶達,併削弱絨毛膜癌細胞的侵襲和增殖能力.結論:CAV-1基因錶達可顯著增彊絨毛膜癌細胞的侵襲潛能,CAV-1 siRNA可抑製絨毛膜癌細胞的侵襲和增殖能力.
목적:탐토소와단백-1(caveolin-1,CAV-1)적표체여융모막암고침습력지간적상관성,병료해RNA간우침묵CAV-1기인대고침습력융모막암JEG-3세포침습력적억제작용.방법:(1)응용Matrigel체외침습시험화새서염비색실험[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumro-mide,MTT]검측융모막암JEG-3세포화JAR세포지간침습능력화증식능력적차이;(2)응용반정량역전록취합매련반응(reverse transeriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)방법검측CAV-1 mRNA재인정상조잉융모조직、불동침습력인융모막암세포주JEG-3급JAR표체적차이;(3)장CAV-1소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)전염지고침습력융모막암JEG-3세포후,채용RT-PCR검측전염후JEG-3세포CAV-1 mRNA표체적변화,병응용Matrigel체외침습시험화MTT법검측JEG-3세포침습화증식능력적변화.결과:(1)JEG-3세포적침습능력현저고우JAR세포(P<0.05),단JEG-3화JAR세포지간증식능력적차이무통계학의의(P>0.05);(2)RT-PCR결과현시재인정상조잉융모조직、고침습성JEG-3세포이급저침습성JAR세포중균가검측도GAV-1 mRNA,장상술삼자중CAV-1 mRNA적표체량진행량량비교,발현인융모막암세포주중CAV-1 mRNA적표체명현고우인정상조잉융모조직,이구유고침습성JEG-3세포중CAV-1 mRNA적표체명현고우JAR세포,차이구유통계학의의(P<0.05),상관성분석현시CAV-1표체수평여융모막암세포침습력정정상관(r=0.86,P<0.05);(3)CAV-1 siRNA가유효억제CAV-1 mRNA적표체,병삭약융모막암세포적침습화증식능력.결론:CAV-1기인표체가현저증강융모막암세포적침습잠능,CAV-1 siRNA가억제융모막암세포적침습화증식능력.