重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2009年
5期
532-536
,共5页
陈富%徐希彦%柯珍勇%尹良军%郭常辉%王雪燕%林春阳%邓忠良
陳富%徐希彥%柯珍勇%尹良軍%郭常輝%王雪燕%林春暘%鄧忠良
진부%서희언%가진용%윤량군%곽상휘%왕설연%림춘양%산충량
腺病毒%人骨保护素%骨髓间充质干细胞
腺病毒%人骨保護素%骨髓間充質榦細胞
선병독%인골보호소%골수간충질간세포
目的:克隆人骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)基因并构建其重组腺病毒,观察其对BMSCs分化的影响.方法:RT-PCR方法从人肝克隆OPG基因全长cDNA,利用穿梭质粒将OPG基因重组获得复制缺陷型重组腺病毒AdOPG;分离培养兔骨髓间充质干细胞,使用AdOPG感染兔BMSCs,以RT-PCR及Western Blot的方法鉴定BMSCs对OPG的表达.比色测定和细胞碱性磷酸酶染色法观察AdOPG感染BMSCs后5 d时碱性磷酸酶(ALP)的表达.结果:克隆获得人OPG基因,测序与Gene bank一致,构建的重组腺病毒AdOPG滴度达109 efu/ml,AdOPG感染BMSCs 5 d后ALP活性值为(21 024±507)IU,AdGFP对照组为(3 079±89)IU,空白对照组为(2 156±78)IU.结论:骨保护素有利于骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化.
目的:剋隆人骨保護素(Osteoprotegerin,OPG)基因併構建其重組腺病毒,觀察其對BMSCs分化的影響.方法:RT-PCR方法從人肝剋隆OPG基因全長cDNA,利用穿梭質粒將OPG基因重組穫得複製缺陷型重組腺病毒AdOPG;分離培養兔骨髓間充質榦細胞,使用AdOPG感染兔BMSCs,以RT-PCR及Western Blot的方法鑒定BMSCs對OPG的錶達.比色測定和細胞堿性燐痠酶染色法觀察AdOPG感染BMSCs後5 d時堿性燐痠酶(ALP)的錶達.結果:剋隆穫得人OPG基因,測序與Gene bank一緻,構建的重組腺病毒AdOPG滴度達109 efu/ml,AdOPG感染BMSCs 5 d後ALP活性值為(21 024±507)IU,AdGFP對照組為(3 079±89)IU,空白對照組為(2 156±78)IU.結論:骨保護素有利于骨髓間充質榦細胞嚮成骨細胞方嚮分化.
목적:극륭인골보호소(Osteoprotegerin,OPG)기인병구건기중조선병독,관찰기대BMSCs분화적영향.방법:RT-PCR방법종인간극륭OPG기인전장cDNA,이용천사질립장OPG기인중조획득복제결함형중조선병독AdOPG;분리배양토골수간충질간세포,사용AdOPG감염토BMSCs,이RT-PCR급Western Blot적방법감정BMSCs대OPG적표체.비색측정화세포감성린산매염색법관찰AdOPG감염BMSCs후5 d시감성린산매(ALP)적표체.결과:극륭획득인OPG기인,측서여Gene bank일치,구건적중조선병독AdOPG적도체109 efu/ml,AdOPG감염BMSCs 5 d후ALP활성치위(21 024±507)IU,AdGFP대조조위(3 079±89)IU,공백대조조위(2 156±78)IU.결론:골보호소유리우골수간충질간세포향성골세포방향분화.
