南京师大学报(自然科学版)
南京師大學報(自然科學版)
남경사대학보(자연과학판)
JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)
2011年
4期
89-95
,共7页
NRAGE%表达调控%DNA甲基化
NRAGE%錶達調控%DNA甲基化
NRAGE%표체조공%DNA갑기화
目的:探讨人NRAGE( Neurotrophin receptor-interacting MAGE homologue)基因启动子区CpG岛甲基化状态及其在乳腺癌细胞中的表达调控.方法:用Real-time PCR检测NRAGE在乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中的表达;软件分析NRAGE启动子区是否存在CpG岛;脱甲基化药物5-Aza-CdR处理MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞,半定量RT-PCR法及Western blot法检测用药前后细胞中NRAGE的mRNA及蛋白表达的变化;MSP法检测MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中NRAGE基因的甲基化状态.结果:NRAGE启动子区存在CpG岛;MDA-MB-231细胞中NRAGE启动子区CpG岛高甲基化,mRNA本底表达水平较低,脱甲基化药物5-Aza-CdR 处理后mRNA及蛋白表达水平明显上升;MCF-7细胞中NRAGE启动子区CpG岛未发生甲基化,mRNA本底表达水平比MDA-MB-231细胞高,5-Aza-CdR处理后mRNA及蛋白表达无明显变化.结论:NRAGE基因甲基化可以对其在乳腺癌细胞中的表达进行调控.
目的:探討人NRAGE( Neurotrophin receptor-interacting MAGE homologue)基因啟動子區CpG島甲基化狀態及其在乳腺癌細胞中的錶達調控.方法:用Real-time PCR檢測NRAGE在乳腺癌細胞MDA-MB-231和MCF-7中的錶達;軟件分析NRAGE啟動子區是否存在CpG島;脫甲基化藥物5-Aza-CdR處理MDA-MB-231細胞和MCF-7細胞,半定量RT-PCR法及Western blot法檢測用藥前後細胞中NRAGE的mRNA及蛋白錶達的變化;MSP法檢測MDA-MB-231細胞和MCF-7細胞中NRAGE基因的甲基化狀態.結果:NRAGE啟動子區存在CpG島;MDA-MB-231細胞中NRAGE啟動子區CpG島高甲基化,mRNA本底錶達水平較低,脫甲基化藥物5-Aza-CdR 處理後mRNA及蛋白錶達水平明顯上升;MCF-7細胞中NRAGE啟動子區CpG島未髮生甲基化,mRNA本底錶達水平比MDA-MB-231細胞高,5-Aza-CdR處理後mRNA及蛋白錶達無明顯變化.結論:NRAGE基因甲基化可以對其在乳腺癌細胞中的錶達進行調控.
목적:탐토인NRAGE( Neurotrophin receptor-interacting MAGE homologue)기인계동자구CpG도갑기화상태급기재유선암세포중적표체조공.방법:용Real-time PCR검측NRAGE재유선암세포MDA-MB-231화MCF-7중적표체;연건분석NRAGE계동자구시부존재CpG도;탈갑기화약물5-Aza-CdR처리MDA-MB-231세포화MCF-7세포,반정량RT-PCR법급Western blot법검측용약전후세포중NRAGE적mRNA급단백표체적변화;MSP법검측MDA-MB-231세포화MCF-7세포중NRAGE기인적갑기화상태.결과:NRAGE계동자구존재CpG도;MDA-MB-231세포중NRAGE계동자구CpG도고갑기화,mRNA본저표체수평교저,탈갑기화약물5-Aza-CdR 처리후mRNA급단백표체수평명현상승;MCF-7세포중NRAGE계동자구CpG도미발생갑기화,mRNA본저표체수평비MDA-MB-231세포고,5-Aza-CdR처리후mRNA급단백표체무명현변화.결론:NRAGE기인갑기화가이대기재유선암세포중적표체진행조공.