基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2012年
6期
644-649
,共6页
胚胎干细胞%神经分化%神经上皮祖细胞%神经干细胞
胚胎榦細胞%神經分化%神經上皮祖細胞%神經榦細胞
배태간세포%신경분화%신경상피조세포%신경간세포
目的 探讨体外诱导、获取均一的神经干细胞群(NSCs)的有效方法,并建立神经干细胞体外稳定传代扩增体系.方法 首先采用无血清的诱导培养基贴壁诱导mESCs形成神经上皮祖细胞(NPCs).然后将经添加表皮生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子-2(FGF2)的无血清培养基短暂悬浮培养后的NPCs再贴壁培养,诱导形成NSCs.通过细胞系46C监测NPCs的形成,同时对分化细胞进行定量PCR和免疫荧光染色,在不同水平检测细胞分化效果.结果 mESCs神经诱导5 d出现大量Soxl+的NPCs；NPCs悬浮培养后,进一步诱导可得到形态均一的NSCs.第2代和第6代NSCs的神经干细胞标志定量PCR检测结果为:Pax6、Nestin、Mashl、BLBP高表达.第8代NSCs免疫荧光染色显示90％以上的细胞均为Nestin、RC2和Pax6阳性.结论 成功诱导mESC生成神经干细胞群,并且可以在体外连续稳定的传代.
目的 探討體外誘導、穫取均一的神經榦細胞群(NSCs)的有效方法,併建立神經榦細胞體外穩定傳代擴增體繫.方法 首先採用無血清的誘導培養基貼壁誘導mESCs形成神經上皮祖細胞(NPCs).然後將經添加錶皮生長因子(EGF)和成纖維細胞生長因子-2(FGF2)的無血清培養基短暫懸浮培養後的NPCs再貼壁培養,誘導形成NSCs.通過細胞繫46C鑑測NPCs的形成,同時對分化細胞進行定量PCR和免疫熒光染色,在不同水平檢測細胞分化效果.結果 mESCs神經誘導5 d齣現大量Soxl+的NPCs；NPCs懸浮培養後,進一步誘導可得到形態均一的NSCs.第2代和第6代NSCs的神經榦細胞標誌定量PCR檢測結果為:Pax6、Nestin、Mashl、BLBP高錶達.第8代NSCs免疫熒光染色顯示90％以上的細胞均為Nestin、RC2和Pax6暘性.結論 成功誘導mESC生成神經榦細胞群,併且可以在體外連續穩定的傳代.
목적 탐토체외유도、획취균일적신경간세포군(NSCs)적유효방법,병건립신경간세포체외은정전대확증체계.방법 수선채용무혈청적유도배양기첩벽유도mESCs형성신경상피조세포(NPCs).연후장경첨가표피생장인자(EGF)화성섬유세포생장인자-2(FGF2)적무혈청배양기단잠현부배양후적NPCs재첩벽배양,유도형성NSCs.통과세포계46C감측NPCs적형성,동시대분화세포진행정량PCR화면역형광염색,재불동수평검측세포분화효과.결과 mESCs신경유도5 d출현대량Soxl+적NPCs；NPCs현부배양후,진일보유도가득도형태균일적NSCs.제2대화제6대NSCs적신경간세포표지정량PCR검측결과위:Pax6、Nestin、Mashl、BLBP고표체.제8대NSCs면역형광염색현시90％이상적세포균위Nestin、RC2화Pax6양성.결론 성공유도mESC생성신경간세포군,병차가이재체외련속은정적전대.
