微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2012年
4期
25-28
,共4页
潘殊男%肖詹蓉%史雨舟%张霖阳%王宇星%李世慧%韩凝%张萍
潘殊男%肖詹蓉%史雨舟%張霖暘%王宇星%李世慧%韓凝%張萍
반수남%초첨용%사우주%장림양%왕우성%리세혜%한응%장평
百日咳%丝状血凝素%酶联免疫吸附试验
百日咳%絲狀血凝素%酶聯免疫吸附試驗
백일해%사상혈응소%매련면역흡부시험
目的 建立百日咳组分疫苗丝状血凝素(FHA)抗原含量监控的ELISA检测法.方法 制备的多克隆抗血清,经辛酸硫酸铵法纯化抗体,用过碘酸钠氧化法辣根过氧化物酶标记,以棋盘滴定法确定最佳包被抗体及酶标抗体的浓度配伍,建立了双抗体夹心ELISA检测法.结果 对双抗体夹心ELISA法的特异性、最佳线性范围、检测限度、精密度、准确度、测定限量、适用性的一系列验证试验表明,该方法与百日咳组分疫苗中PT和Prn无明显交叉反应,特异性较好.在0至20 ng/mL测量区间有最佳线性,相关系数大于0.99;经实验内12次及不同试验间3次测定16、8、4 ng/mL中的FHA含量,变异系数在0.2％～11.4％间,回收率在96.9％ ～ 114.5％间,精密度及准确度验证均符合常规质控要求,因此测定限量为4 ng/mL.结论 该方法能有效检测出百日咳杆菌培养上清中的FHA含量,可用于百日咳组分疫苗生产过程的中间品质量控制.
目的 建立百日咳組分疫苗絲狀血凝素(FHA)抗原含量鑑控的ELISA檢測法.方法 製備的多剋隆抗血清,經辛痠硫痠銨法純化抗體,用過碘痠鈉氧化法辣根過氧化物酶標記,以棋盤滴定法確定最佳包被抗體及酶標抗體的濃度配伍,建立瞭雙抗體夾心ELISA檢測法.結果 對雙抗體夾心ELISA法的特異性、最佳線性範圍、檢測限度、精密度、準確度、測定限量、適用性的一繫列驗證試驗錶明,該方法與百日咳組分疫苗中PT和Prn無明顯交扠反應,特異性較好.在0至20 ng/mL測量區間有最佳線性,相關繫數大于0.99;經實驗內12次及不同試驗間3次測定16、8、4 ng/mL中的FHA含量,變異繫數在0.2％～11.4％間,迴收率在96.9％ ～ 114.5％間,精密度及準確度驗證均符閤常規質控要求,因此測定限量為4 ng/mL.結論 該方法能有效檢測齣百日咳桿菌培養上清中的FHA含量,可用于百日咳組分疫苗生產過程的中間品質量控製.
목적 건립백일해조분역묘사상혈응소(FHA)항원함량감공적ELISA검측법.방법 제비적다극륭항혈청,경신산류산안법순화항체,용과전산납양화법랄근과양화물매표기,이기반적정법학정최가포피항체급매표항체적농도배오,건립료쌍항체협심ELISA검측법.결과 대쌍항체협심ELISA법적특이성、최가선성범위、검측한도、정밀도、준학도、측정한량、괄용성적일계렬험증시험표명,해방법여백일해조분역묘중PT화Prn무명현교차반응,특이성교호.재0지20 ng/mL측량구간유최가선성,상관계수대우0.99;경실험내12차급불동시험간3차측정16、8、4 ng/mL중적FHA함량,변이계수재0.2％～11.4％간,회수솔재96.9％ ～ 114.5％간,정밀도급준학도험증균부합상규질공요구,인차측정한량위4 ng/mL.결론 해방법능유효검측출백일해간균배양상청중적FHA함량,가용우백일해조분역묘생산과정적중간품질량공제.
