中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2005年
23期
1601-1604
,共4页
潘东宁%魏霖%姚明%万大方%顾健人
潘東寧%魏霖%姚明%萬大方%顧健人
반동저%위림%요명%만대방%고건인
RNA%肺肿瘤%基因沉默%CT120A
RNA%肺腫瘤%基因沉默%CT120A
RNA%폐종류%기인침묵%CT120A
目的研究新基因CT120A的表达与肺癌细胞生长的关系.方法构建特异性靶向于CT120A基因的RNA干扰表达质粒小发夹RNA(shRNA)-H,并将其转染肺腺癌细胞株SPC-A-1.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹测定干扰后CT120A表达水平;采用BrdU-TdR掺入实验和软琼脂克隆形成实验进行细胞体外增殖分析;裸鼠成瘤实验测定CT120A基因表达下调后SPC-A-1细胞在体内致瘤能力的改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 RNA干扰表达质粒shRNA-H可以有效抑制CT120A基因的表达,使CT120A mRNA表达减少50%~70%,蛋白表达减少80%;CT120A基因表达下调抑制了SPC-A-1细胞在体外的增殖,降低其在软琼脂中生长形成克隆和在裸鼠体内成瘤的能力,提高细胞对紫外线诱导凋亡的敏感性.结论新基因CT120A与肺癌细胞生长有着密切的关系,CT120A基因可能可以作为药物治疗肺癌的一个新的靶点.
目的研究新基因CT120A的錶達與肺癌細胞生長的關繫.方法構建特異性靶嚮于CT120A基因的RNA榦擾錶達質粒小髮夾RNA(shRNA)-H,併將其轉染肺腺癌細胞株SPC-A-1.逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Western印跡測定榦擾後CT120A錶達水平;採用BrdU-TdR摻入實驗和軟瓊脂剋隆形成實驗進行細胞體外增殖分析;裸鼠成瘤實驗測定CT120A基因錶達下調後SPC-A-1細胞在體內緻瘤能力的改變;流式細胞儀檢測細胞凋亡率.結果 RNA榦擾錶達質粒shRNA-H可以有效抑製CT120A基因的錶達,使CT120A mRNA錶達減少50%~70%,蛋白錶達減少80%;CT120A基因錶達下調抑製瞭SPC-A-1細胞在體外的增殖,降低其在軟瓊脂中生長形成剋隆和在裸鼠體內成瘤的能力,提高細胞對紫外線誘導凋亡的敏感性.結論新基因CT120A與肺癌細胞生長有著密切的關繫,CT120A基因可能可以作為藥物治療肺癌的一箇新的靶點.
목적연구신기인CT120A적표체여폐암세포생장적관계.방법구건특이성파향우CT120A기인적RNA간우표체질립소발협RNA(shRNA)-H,병장기전염폐선암세포주SPC-A-1.역전록-취합매련반응(RT-PCR)화Western인적측정간우후CT120A표체수평;채용BrdU-TdR참입실험화연경지극륭형성실험진행세포체외증식분석;라서성류실험측정CT120A기인표체하조후SPC-A-1세포재체내치류능력적개변;류식세포의검측세포조망솔.결과 RNA간우표체질립shRNA-H가이유효억제CT120A기인적표체,사CT120A mRNA표체감소50%~70%,단백표체감소80%;CT120A기인표체하조억제료SPC-A-1세포재체외적증식,강저기재연경지중생장형성극륭화재라서체내성류적능력,제고세포대자외선유도조망적민감성.결론신기인CT120A여폐암세포생장유착밀절적관계,CT120A기인가능가이작위약물치료폐암적일개신적파점.