中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2004年
6期
547-554
,共8页
谷氨酸棒杆菌%原儿茶酸3,4-双加氧酶%β-酮己二酸途径%芳香化合物降解
穀氨痠棒桿菌%原兒茶痠3,4-雙加氧酶%β-酮己二痠途徑%芳香化閤物降解
곡안산봉간균%원인다산3,4-쌍가양매%β-동기이산도경%방향화합물강해
β-酮己二酸途径的原儿茶酸分支在革兰氏阴性细菌中研究较多,但在革兰氏阳性细菌中的研究却很少.本研究表明谷氨酸棒杆菌能以原儿茶酸、4-羟基苯甲酸、香草醛和对甲酚作为惟一碳源和能源生长,并且生长时诱导表达原儿茶酸3,4-双加氧酶.对谷氨酸棒杆菌基因组分析表明,基因位点ncg12314～ncg12315可能编码原儿茶酸3,4-双加氧酶.通过PCR反应扩增了ncg12314～ncg12315,并克隆到表达载体pET21a上,获得质粒pET21aP34D;携带pET21aP34D的重组大肠杆菌经诱导表达原儿茶酸3,4-双加氧酶.敲除ncg12314～ncg12315后,谷氨酸棒杆菌突变株失去原儿茶酸3,4-双加氧酶活性,同时丧失了利用原儿茶酸、对甲酚、香草醛和4-羟基苯甲酸作为惟一碳源和能源的能力;通过基因互补,这些能力又可重新获得.这些结果证实ncg12314和ncg12315(pcaHG)编码原儿茶酸3,4-双加氧酶.进一步对谷氨酸棒杆菌基因组分析后鉴定到一个完整的编码原儿茶酸分支途径中相关酶的基因簇,该基因簇的独特组织方式为芳香化合物的降解研究提供了新的视点.
β-酮己二痠途徑的原兒茶痠分支在革蘭氏陰性細菌中研究較多,但在革蘭氏暘性細菌中的研究卻很少.本研究錶明穀氨痠棒桿菌能以原兒茶痠、4-羥基苯甲痠、香草醛和對甲酚作為惟一碳源和能源生長,併且生長時誘導錶達原兒茶痠3,4-雙加氧酶.對穀氨痠棒桿菌基因組分析錶明,基因位點ncg12314～ncg12315可能編碼原兒茶痠3,4-雙加氧酶.通過PCR反應擴增瞭ncg12314～ncg12315,併剋隆到錶達載體pET21a上,穫得質粒pET21aP34D;攜帶pET21aP34D的重組大腸桿菌經誘導錶達原兒茶痠3,4-雙加氧酶.敲除ncg12314～ncg12315後,穀氨痠棒桿菌突變株失去原兒茶痠3,4-雙加氧酶活性,同時喪失瞭利用原兒茶痠、對甲酚、香草醛和4-羥基苯甲痠作為惟一碳源和能源的能力;通過基因互補,這些能力又可重新穫得.這些結果證實ncg12314和ncg12315(pcaHG)編碼原兒茶痠3,4-雙加氧酶.進一步對穀氨痠棒桿菌基因組分析後鑒定到一箇完整的編碼原兒茶痠分支途徑中相關酶的基因簇,該基因簇的獨特組織方式為芳香化閤物的降解研究提供瞭新的視點.
β-동기이산도경적원인다산분지재혁란씨음성세균중연구교다,단재혁란씨양성세균중적연구각흔소.본연구표명곡안산봉간균능이원인다산、4-간기분갑산、향초철화대갑분작위유일탄원화능원생장,병차생장시유도표체원인다산3,4-쌍가양매.대곡안산봉간균기인조분석표명,기인위점ncg12314～ncg12315가능편마원인다산3,4-쌍가양매.통과PCR반응확증료ncg12314～ncg12315,병극륭도표체재체pET21a상,획득질립pET21aP34D;휴대pET21aP34D적중조대장간균경유도표체원인다산3,4-쌍가양매.고제ncg12314～ncg12315후,곡안산봉간균돌변주실거원인다산3,4-쌍가양매활성,동시상실료이용원인다산、대갑분、향초철화4-간기분갑산작위유일탄원화능원적능력;통과기인호보,저사능력우가중신획득.저사결과증실ncg12314화ncg12315(pcaHG)편마원인다산3,4-쌍가양매.진일보대곡안산봉간균기인조분석후감정도일개완정적편마원인다산분지도경중상관매적기인족,해기인족적독특조직방식위방향화합물적강해연구제공료신적시점.
