遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2005年
4期
623-628
,共6页
孙美玲%朴锦华%尹长城%杨公社%黄华樑
孫美玲%樸錦華%尹長城%楊公社%黃華樑
손미령%박금화%윤장성%양공사%황화량
SARS%冠状病毒%S蛋白%表达
SARS%冠狀病毒%S蛋白%錶達
SARS%관상병독%S단백%표체
利用生物信息学的工具和方法,对SARS病毒基因组中预测的S蛋白(spike protein)的编码序列进行了分析,预测了其结构特征和可能的功能域.选择其中最有可能参与受体识别及产生主要免疫原性的区域(S401～659)作为待表达区域.将通过PCR获得的此段S蛋白片段的编码序列克隆至大肠杆菌载体pET28a(+)和酵母表达载体pPIC9K中,分别构建了pET28a(+)-S和pPIC9K-S表达质粒,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)-star和毕赤酵母中表达.产物的蛋白电泳和蛋白印记结果表明,S蛋白片段获得成功表达.采用镍离子螯合层析法纯化变性的包涵体样品,纯度达90%以上.
利用生物信息學的工具和方法,對SARS病毒基因組中預測的S蛋白(spike protein)的編碼序列進行瞭分析,預測瞭其結構特徵和可能的功能域.選擇其中最有可能參與受體識彆及產生主要免疫原性的區域(S401～659)作為待錶達區域.將通過PCR穫得的此段S蛋白片段的編碼序列剋隆至大腸桿菌載體pET28a(+)和酵母錶達載體pPIC9K中,分彆構建瞭pET28a(+)-S和pPIC9K-S錶達質粒,轉化至大腸桿菌菌株BL21(DE3)-star和畢赤酵母中錶達.產物的蛋白電泳和蛋白印記結果錶明,S蛋白片段穫得成功錶達.採用鎳離子螯閤層析法純化變性的包涵體樣品,純度達90%以上.
이용생물신식학적공구화방법,대SARS병독기인조중예측적S단백(spike protein)적편마서렬진행료분석,예측료기결구특정화가능적공능역.선택기중최유가능삼여수체식별급산생주요면역원성적구역(S401～659)작위대표체구역.장통과PCR획득적차단S단백편단적편마서렬극륭지대장간균재체pET28a(+)화효모표체재체pPIC9K중,분별구건료pET28a(+)-S화pPIC9K-S표체질립,전화지대장간균균주BL21(DE3)-star화필적효모중표체.산물적단백전영화단백인기결과표명,S단백편단획득성공표체.채용얼리자오합층석법순화변성적포함체양품,순도체90%이상.
