生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2006年
1期
59-64
,共6页
周海君%刘银坤%崔杰峰%金红%魏黎明%樊惠芝%郭坤%杨芃原
週海君%劉銀坤%崔傑峰%金紅%魏黎明%樊惠芝%郭坤%楊芃原
주해군%류은곤%최걸봉%금홍%위려명%번혜지%곽곤%양봉원
肝癌细胞%糖基化蛋白%糖蛋白染色%双向电泳
肝癌細胞%糖基化蛋白%糖蛋白染色%雙嚮電泳
간암세포%당기화단백%당단백염색%쌍향전영
糖基化是最重要的蛋白质翻译后形式之一,糖基化蛋白的糖链部分影响着蛋白质的折叠和稳定性以及其生物学功能·许多恶性肿瘤组织与正常组织相比已显示出蛋白质糖基化的差异.采用蛋白质组学分析方法结合先进的糖蛋白荧光染色技术,研究了正常人肝细胞系(Chang Liver)和人肝癌细胞系(Hep3B)糖蛋白糖基化的差异.首先用细胞裂解法提取细胞总蛋白质,进行双向电泳(2-DE),然后用pro-Q Emerald488糖蛋白荧光染料进行糖蛋白染色,得到两种细胞系糖基化蛋白表达谱,经2-DE分析软件Dymension分析2-DE图像,比较糖蛋白的糖基化程度,并对糖基化蛋白进行质谱鉴定.结果显示正常人肝细胞表达(74±2)个(n=3),而人肝癌细胞系表达(78±3)个糖蛋白(n=3).两者匹配的糖蛋白质点31个,Hep3B表达而ChangLiver不表达的糖蛋白质点47个,Chang Liver表达而Hep3B不表达的糖蛋白质点43个.两种细胞系糖基化程度存在明显差异,与正常人肝细胞相比,肝癌细胞发生糖基化改变的糖蛋白有25个,其中糖基化水平上调的有10个,下调的有15个,质谱鉴定出12个发生糖基化改变的糖蛋白.这些结果显示蛋白质糖基化改变可能在肝癌的发生和发展中起一定作用.
糖基化是最重要的蛋白質翻譯後形式之一,糖基化蛋白的糖鏈部分影響著蛋白質的摺疊和穩定性以及其生物學功能·許多噁性腫瘤組織與正常組織相比已顯示齣蛋白質糖基化的差異.採用蛋白質組學分析方法結閤先進的糖蛋白熒光染色技術,研究瞭正常人肝細胞繫(Chang Liver)和人肝癌細胞繫(Hep3B)糖蛋白糖基化的差異.首先用細胞裂解法提取細胞總蛋白質,進行雙嚮電泳(2-DE),然後用pro-Q Emerald488糖蛋白熒光染料進行糖蛋白染色,得到兩種細胞繫糖基化蛋白錶達譜,經2-DE分析軟件Dymension分析2-DE圖像,比較糖蛋白的糖基化程度,併對糖基化蛋白進行質譜鑒定.結果顯示正常人肝細胞錶達(74±2)箇(n=3),而人肝癌細胞繫錶達(78±3)箇糖蛋白(n=3).兩者匹配的糖蛋白質點31箇,Hep3B錶達而ChangLiver不錶達的糖蛋白質點47箇,Chang Liver錶達而Hep3B不錶達的糖蛋白質點43箇.兩種細胞繫糖基化程度存在明顯差異,與正常人肝細胞相比,肝癌細胞髮生糖基化改變的糖蛋白有25箇,其中糖基化水平上調的有10箇,下調的有15箇,質譜鑒定齣12箇髮生糖基化改變的糖蛋白.這些結果顯示蛋白質糖基化改變可能在肝癌的髮生和髮展中起一定作用.
당기화시최중요적단백질번역후형식지일,당기화단백적당련부분영향착단백질적절첩화은정성이급기생물학공능·허다악성종류조직여정상조직상비이현시출단백질당기화적차이.채용단백질조학분석방법결합선진적당단백형광염색기술,연구료정상인간세포계(Chang Liver)화인간암세포계(Hep3B)당단백당기화적차이.수선용세포렬해법제취세포총단백질,진행쌍향전영(2-DE),연후용pro-Q Emerald488당단백형광염료진행당단백염색,득도량충세포계당기화단백표체보,경2-DE분석연건Dymension분석2-DE도상,비교당단백적당기화정도,병대당기화단백진행질보감정.결과현시정상인간세포표체(74±2)개(n=3),이인간암세포계표체(78±3)개당단백(n=3).량자필배적당단백질점31개,Hep3B표체이ChangLiver불표체적당단백질점47개,Chang Liver표체이Hep3B불표체적당단백질점43개.량충세포계당기화정도존재명현차이,여정상인간세포상비,간암세포발생당기화개변적당단백유25개,기중당기화수평상조적유10개,하조적유15개,질보감정출12개발생당기화개변적당단백.저사결과현시단백질당기화개변가능재간암적발생화발전중기일정작용.
