中国现代医学杂志
中國現代醫學雜誌
중국현대의학잡지
CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE
2006年
18期
2734-2737
,共4页
徐迪晖%王继德%姜泊%张以洋%智发朝%陈利
徐迪暉%王繼德%薑泊%張以洋%智髮朝%陳利
서적휘%왕계덕%강박%장이양%지발조%진리
胃癌%survivin%启动子%基因治疗
胃癌%survivin%啟動子%基因治療
위암%survivin%계동자%기인치료
目的 克隆survivin启动子的有效片段,并检测它在人胃癌细胞株AGS和人正常胃上皮细胞GES-1中的转录活性,为该启动子在胃癌的靶向性基因治疗中奠定基础.方法 用PCR扩增survivin基因的启动子片段,克隆入荧光素酶报告质粒pGL3-Basic,构建pGL3-sur-pro重组质粒,用脂质体法瞬时转染AGS及GES-1中,检测survivin启动子在细胞中的转录活性.同时构建含CMV启动子的pGL3-CMV-pro重组质粒作为阳性对照.结果 琼脂糖凝胶电泳显示PCR扩增的survivin启动子片段长约440 bp,测序结果与GenBank中survivin启动子序列一致.成功构建了pGL3-sur-pro重组质粒.荧光素酶活性检测显示,survivin启动子片段在细胞株AGS中有较高转录活性,而在GES-1中几无转录活性.结论 本实验克隆的survivin启动子有效片段在胃癌细胞株AGS中有转录活性,在正常胃上皮细胞中无活性.其有可能作为调控元件用于胃癌的靶向性基因治疗.
目的 剋隆survivin啟動子的有效片段,併檢測它在人胃癌細胞株AGS和人正常胃上皮細胞GES-1中的轉錄活性,為該啟動子在胃癌的靶嚮性基因治療中奠定基礎.方法 用PCR擴增survivin基因的啟動子片段,剋隆入熒光素酶報告質粒pGL3-Basic,構建pGL3-sur-pro重組質粒,用脂質體法瞬時轉染AGS及GES-1中,檢測survivin啟動子在細胞中的轉錄活性.同時構建含CMV啟動子的pGL3-CMV-pro重組質粒作為暘性對照.結果 瓊脂糖凝膠電泳顯示PCR擴增的survivin啟動子片段長約440 bp,測序結果與GenBank中survivin啟動子序列一緻.成功構建瞭pGL3-sur-pro重組質粒.熒光素酶活性檢測顯示,survivin啟動子片段在細胞株AGS中有較高轉錄活性,而在GES-1中幾無轉錄活性.結論 本實驗剋隆的survivin啟動子有效片段在胃癌細胞株AGS中有轉錄活性,在正常胃上皮細胞中無活性.其有可能作為調控元件用于胃癌的靶嚮性基因治療.
목적 극륭survivin계동자적유효편단,병검측타재인위암세포주AGS화인정상위상피세포GES-1중적전록활성,위해계동자재위암적파향성기인치료중전정기출.방법 용PCR확증survivin기인적계동자편단,극륭입형광소매보고질립pGL3-Basic,구건pGL3-sur-pro중조질립,용지질체법순시전염AGS급GES-1중,검측survivin계동자재세포중적전록활성.동시구건함CMV계동자적pGL3-CMV-pro중조질립작위양성대조.결과 경지당응효전영현시PCR확증적survivin계동자편단장약440 bp,측서결과여GenBank중survivin계동자서렬일치.성공구건료pGL3-sur-pro중조질립.형광소매활성검측현시,survivin계동자편단재세포주AGS중유교고전록활성,이재GES-1중궤무전록활성.결론 본실험극륭적survivin계동자유효편단재위암세포주AGS중유전록활성,재정상위상피세포중무활성.기유가능작위조공원건용우위암적파향성기인치료.
