基于接近效应聚合反应与核酸适体的蛋白质检测新方法
기우접근효응취합반응여핵산괄체적단백질검측신방법
  • 万方数据
    科学通报 과학통보
    CHINESE SCIENCE BULLETIN
    2007年 20期 2363-2366 ,共4页

    羊小海%王蕾%王柯敏%谭蔚泓%唐红星%孟祥贤%郭秋平

    양소해%왕뢰%왕가민%담위홍%당홍성%맹상현%곽추평

    核酸适体%凝血酶%聚合反应%蛋白质检测 覈痠適體%凝血酶%聚閤反應%蛋白質檢測
    핵산괄체%응혈매%취합반응%단백질검측
    以核酸适体作为识别分子, 建立了一种简单、灵敏特异的蛋白质检测新方法. 该方法以凝血酶为目标蛋白, 针对其两个结合位点, 分别设计了两条具有3′末端互补碱基序列的核酸适体探针. 当两条探针同时与凝血酶结合时, 末端借助接近效应形成稳定的杂交并在聚合酶的作用下发生聚合反应, 双链DNA产物的量通过Sybr GreenⅠ的荧光信号指示出来. 实验结果表明, 聚合反应初速度与凝血酶的浓度正相关. 本方法中核酸适体探针设计简单灵活, 对目标蛋白选择性和灵敏度高, 检测下限可达到6.9 pmol/L.
    이핵산괄체작위식별분자, 건립료일충간단、령민특이적단백질검측신방법. 해방법이응혈매위목표단백, 침대기량개결합위점, 분별설계료량조구유3′말단호보감기서렬적핵산괄체탐침. 당량조탐침동시여응혈매결합시, 말단차조접근효응형성은정적잡교병재취합매적작용하발생취합반응, 쌍련DNA산물적량통과Sybr GreenⅠ적형광신호지시출래. 실험결과표명, 취합반응초속도여응혈매적농도정상관. 본방법중핵산괄체탐침설계간단령활, 대목표단백선택성화령민도고, 검측하한가체도6.9 pmol/L.
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