西部林业科学
西部林業科學
서부임업과학
JOURNAL OF WEST CHINA FORESTRY SCIENCE
2008年
2期
86-90
,共5页
易善军%陈少瑜%程在全%孙一丁%王寅冰%陈芳%吴涛
易善軍%陳少瑜%程在全%孫一丁%王寅冰%陳芳%吳濤
역선군%진소유%정재전%손일정%왕인빙%진방%오도
抗虫基因%CryIA(b)基因%植物表达载体
抗蟲基因%CryIA(b)基因%植物錶達載體
항충기인%CryIA(b)기인%식물표체재체
苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因具有对鳞翅目昆虫的毒杀作用,因此被广泛用于转基因研究,以提高植物的抗虫能力.故以含有CryIA(b)基因的PKUB质粒为模板,利用PCR技术克隆出抗虫基因[CryIA(b)],将其构建到PGEMT-Easy上,获得重组质粒PGEMT-CryIA(b),并测定全部序列,将PGEMT-CryIA(b)用BamHI 和SmaI酶切后插入表达载体PBI121的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建成准备用于丽江云杉等针叶树种遗传转化CryIA(b)基因的植物表达载体PBI-CryIA(b),采用液氮冻融法将其转化到根癌农杆菌LBA4404和C58中,为下一步的转化工作奠定了基础.
囌雲金芽孢桿菌殺蟲晶體蛋白基因具有對鱗翅目昆蟲的毒殺作用,因此被廣汎用于轉基因研究,以提高植物的抗蟲能力.故以含有CryIA(b)基因的PKUB質粒為模闆,利用PCR技術剋隆齣抗蟲基因[CryIA(b)],將其構建到PGEMT-Easy上,穫得重組質粒PGEMT-CryIA(b),併測定全部序列,將PGEMT-CryIA(b)用BamHI 和SmaI酶切後插入錶達載體PBI121的CaMV35S啟動子和NOS終止子之間,構建成準備用于麗江雲杉等針葉樹種遺傳轉化CryIA(b)基因的植物錶達載體PBI-CryIA(b),採用液氮凍融法將其轉化到根癌農桿菌LBA4404和C58中,為下一步的轉化工作奠定瞭基礎.
소운금아포간균살충정체단백기인구유대린시목곤충적독살작용,인차피엄범용우전기인연구,이제고식물적항충능력.고이함유CryIA(b)기인적PKUB질립위모판,이용PCR기술극륭출항충기인[CryIA(b)],장기구건도PGEMT-Easy상,획득중조질립PGEMT-CryIA(b),병측정전부서렬,장PGEMT-CryIA(b)용BamHI 화SmaI매절후삽입표체재체PBI121적CaMV35S계동자화NOS종지자지간,구건성준비용우려강운삼등침협수충유전전화CryIA(b)기인적식물표체재체PBI-CryIA(b),채용액담동융법장기전화도근암농간균LBA4404화C58중,위하일보적전화공작전정료기출.
