上海医学
上海醫學
상해의학
SHANGHAI MEDICAL JOURNAL
2009年
8期
697-701,封3
,共6页
吴跃春%任雨笙%梁春%谭鸿斌%吴建祥%吴宗贵
吳躍春%任雨笙%樑春%譚鴻斌%吳建祥%吳宗貴
오약춘%임우생%량춘%담홍빈%오건상%오종귀
葡萄糖%人内皮祖细胞%增殖%凋亡%内皮型一氧化氮合酶
葡萄糖%人內皮祖細胞%增殖%凋亡%內皮型一氧化氮閤酶
포도당%인내피조세포%증식%조망%내피형일양화담합매
目的 研究葡萄糖浓度波动对人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖、凋亡及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响.方法 采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,经含血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和10%胎牛血清的M199培养基培养7 d,贴壁细胞鉴定为EPCs.细胞同化后给予葡萄糖浓度5.5 mmol/L(正常对照组)、30 mmol/L(糖浓度固定组)和20或40 mmol/L(平均浓度为30 mmol/L,波动间期为3 h,糖浓度波动组).干预6、12、24、48、96 h后,采用WST-1细胞增殖检测试剂盒处理细胞,酶标仪检测细胞增殖;以AnnexinV-FITC凋亡检测试剂盒处理细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡;以一氧化氮合酶检测试剂盒处理细胞,荧光酶标仪检测eNOS活性.结果 当平均浓度相同时,与糖浓度固定组相比,糖浓度波动组抑制EPCs增殖及eNOS活性的作用显著增强(P值均＜0.05),凋亡率显著增高(P＜0.05);糖浓度固定组与糖浓度波动组的增殖率、凋亡率、eNOS活性的差值与干预时间呈正相关(r值分别=0.937、0.927、和0.951,P值均＜0.05).结论 葡萄糖浓度波动作为独立因素促进EPCs的凋亡、抑制EPCs的增殖并降低eNOS的活性.EPCs对葡萄糖浓度波动的适应性差.
目的 研究葡萄糖濃度波動對人外週血內皮祖細胞(EPCs)增殖、凋亡及內皮型一氧化氮閤酶(eNOS)活性的影響.方法 採用密度梯度離心法分離外週血單箇覈細胞,經含血管內皮生長因子、堿性成纖維細胞生長因子和10%胎牛血清的M199培養基培養7 d,貼壁細胞鑒定為EPCs.細胞同化後給予葡萄糖濃度5.5 mmol/L(正常對照組)、30 mmol/L(糖濃度固定組)和20或40 mmol/L(平均濃度為30 mmol/L,波動間期為3 h,糖濃度波動組).榦預6、12、24、48、96 h後,採用WST-1細胞增殖檢測試劑盒處理細胞,酶標儀檢測細胞增殖;以AnnexinV-FITC凋亡檢測試劑盒處理細胞,流式細胞儀檢測細胞凋亡;以一氧化氮閤酶檢測試劑盒處理細胞,熒光酶標儀檢測eNOS活性.結果 噹平均濃度相同時,與糖濃度固定組相比,糖濃度波動組抑製EPCs增殖及eNOS活性的作用顯著增彊(P值均＜0.05),凋亡率顯著增高(P＜0.05);糖濃度固定組與糖濃度波動組的增殖率、凋亡率、eNOS活性的差值與榦預時間呈正相關(r值分彆=0.937、0.927、和0.951,P值均＜0.05).結論 葡萄糖濃度波動作為獨立因素促進EPCs的凋亡、抑製EPCs的增殖併降低eNOS的活性.EPCs對葡萄糖濃度波動的適應性差.
목적 연구포도당농도파동대인외주혈내피조세포(EPCs)증식、조망급내피형일양화담합매(eNOS)활성적영향.방법 채용밀도제도리심법분리외주혈단개핵세포,경함혈관내피생장인자、감성성섬유세포생장인자화10%태우혈청적M199배양기배양7 d,첩벽세포감정위EPCs.세포동화후급여포도당농도5.5 mmol/L(정상대조조)、30 mmol/L(당농도고정조)화20혹40 mmol/L(평균농도위30 mmol/L,파동간기위3 h,당농도파동조).간예6、12、24、48、96 h후,채용WST-1세포증식검측시제합처리세포,매표의검측세포증식;이AnnexinV-FITC조망검측시제합처리세포,류식세포의검측세포조망;이일양화담합매검측시제합처리세포,형광매표의검측eNOS활성.결과 당평균농도상동시,여당농도고정조상비,당농도파동조억제EPCs증식급eNOS활성적작용현저증강(P치균＜0.05),조망솔현저증고(P＜0.05);당농도고정조여당농도파동조적증식솔、조망솔、eNOS활성적차치여간예시간정정상관(r치분별=0.937、0.927、화0.951,P치균＜0.05).결론 포도당농도파동작위독립인소촉진EPCs적조망、억제EPCs적증식병강저eNOS적활성.EPCs대포도당농도파동적괄응성차.
