福建医科大学学报
福建醫科大學學報
복건의과대학학보
JOURNAL OF FUJIAN MEDICAL UNIVERSITY
2009年
4期
288-291
,共4页
张捷%王川%郭雯珲%傅芳萌%洪天姿%郑美春
張捷%王川%郭雯琿%傅芳萌%洪天姿%鄭美春
장첩%왕천%곽문혼%부방맹%홍천자%정미춘
抑制因子%免疫%真核细胞%遗传载体%胃肿瘤%转染
抑製因子%免疫%真覈細胞%遺傳載體%胃腫瘤%轉染
억제인자%면역%진핵세포%유전재체%위종류%전염
目的 构建正义、反义Id1真核表达载体,并转染胃癌SGC7901细胞株,筛选稳定表达的细胞株. 方法 设计Id1基因两端的引物,RT-PCR扩增Id1全长序列.将目的 基因插入pcDNA3.1+/Hygro构建正义Id1真核表达载体,插入pcDNA3.1-/Hygro构建反义Id1真核表达载体.脂质体转染法转染胃癌SGC7901细胞系,潮霉素筛选稳定表达的细胞株. 结果 RT-PCR法获得长约530 bp的Id1全长序列,经酶切及测序鉴定正确后转染胃癌SGC7901细胞株.经过潮霉素筛选8周,获得抗性的细胞株.经Western-blot鉴定,转染正义Id1真核表达载体的细胞株Id1蛋白表达水平高于对照组,而转染反义Id1真核表达载体的细胞株Id1蛋白表达水平低于对照组. 结论 成功构建正义、反义Id1真核表达载体并转染胃癌SGC7901细胞株,为进一步研究打下基础.
目的 構建正義、反義Id1真覈錶達載體,併轉染胃癌SGC7901細胞株,篩選穩定錶達的細胞株. 方法 設計Id1基因兩耑的引物,RT-PCR擴增Id1全長序列.將目的 基因插入pcDNA3.1+/Hygro構建正義Id1真覈錶達載體,插入pcDNA3.1-/Hygro構建反義Id1真覈錶達載體.脂質體轉染法轉染胃癌SGC7901細胞繫,潮黴素篩選穩定錶達的細胞株. 結果 RT-PCR法穫得長約530 bp的Id1全長序列,經酶切及測序鑒定正確後轉染胃癌SGC7901細胞株.經過潮黴素篩選8週,穫得抗性的細胞株.經Western-blot鑒定,轉染正義Id1真覈錶達載體的細胞株Id1蛋白錶達水平高于對照組,而轉染反義Id1真覈錶達載體的細胞株Id1蛋白錶達水平低于對照組. 結論 成功構建正義、反義Id1真覈錶達載體併轉染胃癌SGC7901細胞株,為進一步研究打下基礎.
목적 구건정의、반의Id1진핵표체재체,병전염위암SGC7901세포주,사선은정표체적세포주. 방법 설계Id1기인량단적인물,RT-PCR확증Id1전장서렬.장목적 기인삽입pcDNA3.1+/Hygro구건정의Id1진핵표체재체,삽입pcDNA3.1-/Hygro구건반의Id1진핵표체재체.지질체전염법전염위암SGC7901세포계,조매소사선은정표체적세포주. 결과 RT-PCR법획득장약530 bp적Id1전장서렬,경매절급측서감정정학후전염위암SGC7901세포주.경과조매소사선8주,획득항성적세포주.경Western-blot감정,전염정의Id1진핵표체재체적세포주Id1단백표체수평고우대조조,이전염반의Id1진핵표체재체적세포주Id1단백표체수평저우대조조. 결론 성공구건정의、반의Id1진핵표체재체병전염위암SGC7901세포주,위진일보연구타하기출.
