江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
6期
1216-1221
,共6页
SARS%刺突蛋白%S2蛋白%重组腺病毒%免疫
SARS%刺突蛋白%S2蛋白%重組腺病毒%免疫
SARS%자돌단백%S2단백%중조선병독%면역
编码SARS冠状病毒S蛋白(Spike protein)的C端序列S2较为保守,可作为SARS病毒疫苗研究的候选抗原基因.该研究拟构建基于SARS病毒S2蛋白的重组腺病毒疫苗并对其进行免疫学初步分析.首先通过非对称PCR方法,将人工合成的S2蛋白基因的两个片段f3和f4进行拼接得到完整的S2片段,利用Ad5腺病毒系统构建S2蛋白基因的重组腺病毒并在AD293细胞中包装成病毒颗粒,采用间接免疫荧光和蛋白免疫印迹法对S2蛋白基因的表达进行鉴定,然后用此重组腺病毒免疫小鼠对其抗体生长情况进行分析.免疫荧光和蛋白印迹分析结果显示,携带SARS病毒S2蛋白基因的重组腺病毒rAd-S2能在细胞中成功表达,表达的S2蛋白能被马抗SARS血清所识别.ELISA分析结果表明,用表达SARS病毒S2蛋白的重组腺病毒rAd-S2免疫小鼠,能有效刺激小鼠机体产生抗体,重组腺病毒免疫小鼠后所产生的抗体水平最高能达到104以上.可见通过对SARS病毒S2蛋白基因重组腺病毒的成功构建与免疫学初步分析,能为SARS疫苗研究奠定基础.
編碼SARS冠狀病毒S蛋白(Spike protein)的C耑序列S2較為保守,可作為SARS病毒疫苗研究的候選抗原基因.該研究擬構建基于SARS病毒S2蛋白的重組腺病毒疫苗併對其進行免疫學初步分析.首先通過非對稱PCR方法,將人工閤成的S2蛋白基因的兩箇片段f3和f4進行拼接得到完整的S2片段,利用Ad5腺病毒繫統構建S2蛋白基因的重組腺病毒併在AD293細胞中包裝成病毒顆粒,採用間接免疫熒光和蛋白免疫印跡法對S2蛋白基因的錶達進行鑒定,然後用此重組腺病毒免疫小鼠對其抗體生長情況進行分析.免疫熒光和蛋白印跡分析結果顯示,攜帶SARS病毒S2蛋白基因的重組腺病毒rAd-S2能在細胞中成功錶達,錶達的S2蛋白能被馬抗SARS血清所識彆.ELISA分析結果錶明,用錶達SARS病毒S2蛋白的重組腺病毒rAd-S2免疫小鼠,能有效刺激小鼠機體產生抗體,重組腺病毒免疫小鼠後所產生的抗體水平最高能達到104以上.可見通過對SARS病毒S2蛋白基因重組腺病毒的成功構建與免疫學初步分析,能為SARS疫苗研究奠定基礎.
편마SARS관상병독S단백(Spike protein)적C단서렬S2교위보수,가작위SARS병독역묘연구적후선항원기인.해연구의구건기우SARS병독S2단백적중조선병독역묘병대기진행면역학초보분석.수선통과비대칭PCR방법,장인공합성적S2단백기인적량개편단f3화f4진행병접득도완정적S2편단,이용Ad5선병독계통구건S2단백기인적중조선병독병재AD293세포중포장성병독과립,채용간접면역형광화단백면역인적법대S2단백기인적표체진행감정,연후용차중조선병독면역소서대기항체생장정황진행분석.면역형광화단백인적분석결과현시,휴대SARS병독S2단백기인적중조선병독rAd-S2능재세포중성공표체,표체적S2단백능피마항SARS혈청소식별.ELISA분석결과표명,용표체SARS병독S2단백적중조선병독rAd-S2면역소서,능유효자격소서궤체산생항체,중조선병독면역소서후소산생적항체수평최고능체도104이상.가견통과대SARS병독S2단백기인중조선병독적성공구건여면역학초보분석,능위SARS역묘연구전정기출.
