中华结核和呼吸杂志
中華結覈和呼吸雜誌
중화결핵화호흡잡지
Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases
2007年
2期
108-111
,共4页
柳永蕾%宋现让%王兴武%魏玲%李大鹏
柳永蕾%宋現讓%王興武%魏玲%李大鵬
류영뢰%송현양%왕흥무%위령%리대붕
肺肿瘤%细胞低氧%谷胱甘肽转移酶
肺腫瘤%細胞低氧%穀胱甘肽轉移酶
폐종류%세포저양%곡광감태전이매
目的 探讨长期缺氧对SPCA1细胞谷胱甘肽转移酶(GST-π)表达的影响及耐药性的改变.方法 SPCA1细胞常氧(20%O2)和缺氧(0.5%O2)条件下作用16 h后,提取RNA和蛋白,用定量RT-PCR的方法检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和GST-πmRNA的表达情况,用Western blotting法检测HIF-1α蛋白;制备细胞悬液,用流式细胞仪测定GST-π表达;通过克隆形成实验分析SPCA1细胞对阿霉素和丝裂霉素的药物敏感性.通过RNA干扰技术下调HIF-1α表达后,分为对照组和干扰组,观察GST-π的表达.结果 设常氧组GST-π mRNA表达率为1,缺氧组为12.2.常氧组GST-π蛋白阳性表达率为(35.78±1.25)%,缺氧组为(72.13±2.11)%.与常氧组比较缺氧组HIF-1α表达明显增加.计算1%克隆存活的药物浓度,阿霉素处理细胞,常氧组浓度为(0.29±0.05)μg/ml;缺氧组浓度为(0.48±0.07)μg/ml;丝裂霉素处理细胞,常氧组浓度为(0.71±0.10)μg/ml;缺氧组浓度为(0.79±0.12)μg/ml.干扰HIF-1α后,HIF-1α mRNA与对照组比较下降了70%,而GST-πmRNA稍有下降.GST-π蛋白表达常氧条件下对照组为(32.14±1.23)%,干扰组为(30.88±1.65)%;缺氧条件下对照组为(64.78±2.45)%,干扰组为(67.42±2.21)%.结论 长期缺氧可诱导SPCA1细胞HIF-1α和GST-π表达增加,对阿霉素耐药性增加,对丝裂霉素没有影响,HIF-1和GST-π并没有直接的相关性.
目的 探討長期缺氧對SPCA1細胞穀胱甘肽轉移酶(GST-π)錶達的影響及耐藥性的改變.方法 SPCA1細胞常氧(20%O2)和缺氧(0.5%O2)條件下作用16 h後,提取RNA和蛋白,用定量RT-PCR的方法檢測缺氧誘導因子1α(HIF-1α)和GST-πmRNA的錶達情況,用Western blotting法檢測HIF-1α蛋白;製備細胞懸液,用流式細胞儀測定GST-π錶達;通過剋隆形成實驗分析SPCA1細胞對阿黴素和絲裂黴素的藥物敏感性.通過RNA榦擾技術下調HIF-1α錶達後,分為對照組和榦擾組,觀察GST-π的錶達.結果 設常氧組GST-π mRNA錶達率為1,缺氧組為12.2.常氧組GST-π蛋白暘性錶達率為(35.78±1.25)%,缺氧組為(72.13±2.11)%.與常氧組比較缺氧組HIF-1α錶達明顯增加.計算1%剋隆存活的藥物濃度,阿黴素處理細胞,常氧組濃度為(0.29±0.05)μg/ml;缺氧組濃度為(0.48±0.07)μg/ml;絲裂黴素處理細胞,常氧組濃度為(0.71±0.10)μg/ml;缺氧組濃度為(0.79±0.12)μg/ml.榦擾HIF-1α後,HIF-1α mRNA與對照組比較下降瞭70%,而GST-πmRNA稍有下降.GST-π蛋白錶達常氧條件下對照組為(32.14±1.23)%,榦擾組為(30.88±1.65)%;缺氧條件下對照組為(64.78±2.45)%,榦擾組為(67.42±2.21)%.結論 長期缺氧可誘導SPCA1細胞HIF-1α和GST-π錶達增加,對阿黴素耐藥性增加,對絲裂黴素沒有影響,HIF-1和GST-π併沒有直接的相關性.
목적 탐토장기결양대SPCA1세포곡광감태전이매(GST-π)표체적영향급내약성적개변.방법 SPCA1세포상양(20%O2)화결양(0.5%O2)조건하작용16 h후,제취RNA화단백,용정량RT-PCR적방법검측결양유도인자1α(HIF-1α)화GST-πmRNA적표체정황,용Western blotting법검측HIF-1α단백;제비세포현액,용류식세포의측정GST-π표체;통과극륭형성실험분석SPCA1세포대아매소화사렬매소적약물민감성.통과RNA간우기술하조HIF-1α표체후,분위대조조화간우조,관찰GST-π적표체.결과 설상양조GST-π mRNA표체솔위1,결양조위12.2.상양조GST-π단백양성표체솔위(35.78±1.25)%,결양조위(72.13±2.11)%.여상양조비교결양조HIF-1α표체명현증가.계산1%극륭존활적약물농도,아매소처리세포,상양조농도위(0.29±0.05)μg/ml;결양조농도위(0.48±0.07)μg/ml;사렬매소처리세포,상양조농도위(0.71±0.10)μg/ml;결양조농도위(0.79±0.12)μg/ml.간우HIF-1α후,HIF-1α mRNA여대조조비교하강료70%,이GST-πmRNA초유하강.GST-π단백표체상양조건하대조조위(32.14±1.23)%,간우조위(30.88±1.65)%;결양조건하대조조위(64.78±2.45)%,간우조위(67.42±2.21)%.결론 장기결양가유도SPCA1세포HIF-1α화GST-π표체증가,대아매소내약성증가,대사렬매소몰유영향,HIF-1화GST-π병몰유직접적상관성.
