细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2004年
6期
689-692
,共4页
王舰平%赵树进%王捷%武婕%杨太成%杨静
王艦平%趙樹進%王捷%武婕%楊太成%楊靜
왕함평%조수진%왕첩%무첩%양태성%양정
木瓜凝乳蛋白酶%可变区基因%单链抗体%噬菌体抗体库
木瓜凝乳蛋白酶%可變區基因%單鏈抗體%噬菌體抗體庫
목과응유단백매%가변구기인%단련항체%서균체항체고
目的: 构建抗木瓜凝乳蛋白酶全套单链抗体(scFv)噬菌体表面展示文库.方法: 从木瓜凝乳蛋白酶免疫小鼠的淋巴细胞中提取总RNA, 反转录成cDNA后, 用抗体V区简并引物扩增全套VH和VL基因.经重叠延伸反应, 装配成scFv基因, 并将其克隆到噬粒载体pFAB5C中, 构建scFv噬菌体抗体库.对抗体库进行亲和筛选后, 用ELISA法鉴定抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv.结果: 经4轮"亲和-吸附-洗脱"的富集过程, 得到ELISA活性较高可与木瓜凝乳蛋白酶结合的克隆.结论: 成功地构建了抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv噬菌体展示文库, 并筛选到与木瓜凝乳蛋白酶具有结合能力的scFv基因.
目的: 構建抗木瓜凝乳蛋白酶全套單鏈抗體(scFv)噬菌體錶麵展示文庫.方法: 從木瓜凝乳蛋白酶免疫小鼠的淋巴細胞中提取總RNA, 反轉錄成cDNA後, 用抗體V區簡併引物擴增全套VH和VL基因.經重疊延伸反應, 裝配成scFv基因, 併將其剋隆到噬粒載體pFAB5C中, 構建scFv噬菌體抗體庫.對抗體庫進行親和篩選後, 用ELISA法鑒定抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv.結果: 經4輪"親和-吸附-洗脫"的富集過程, 得到ELISA活性較高可與木瓜凝乳蛋白酶結閤的剋隆.結論: 成功地構建瞭抗木瓜凝乳蛋白酶的scFv噬菌體展示文庫, 併篩選到與木瓜凝乳蛋白酶具有結閤能力的scFv基因.
목적: 구건항목과응유단백매전투단련항체(scFv)서균체표면전시문고.방법: 종목과응유단백매면역소서적림파세포중제취총RNA, 반전록성cDNA후, 용항체V구간병인물확증전투VH화VL기인.경중첩연신반응, 장배성scFv기인, 병장기극륭도서립재체pFAB5C중, 구건scFv서균체항체고.대항체고진행친화사선후, 용ELISA법감정항목과응유단백매적scFv.결과: 경4륜"친화-흡부-세탈"적부집과정, 득도ELISA활성교고가여목과응유단백매결합적극륭.결론: 성공지구건료항목과응유단백매적scFv서균체전시문고, 병사선도여목과응유단백매구유결합능력적scFv기인.
