生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
15-18
,共4页
滕霞%杨申%李前%孙曼霁
滕霞%楊申%李前%孫曼霽
등하%양신%리전%손만제
对氧磷酶%原核表达%包涵体
對氧燐酶%原覈錶達%包涵體
대양린매%원핵표체%포함체
目的:应用大肠杆菌原核表达系统高效表达人血清Q型对氧磷酶(PON1).方法:从pBlueScript-PON1重组质粒中通过PCR扩增得到了人PON1基因,将其亚克隆至原核表达载体pBV220中,构建了重组表达质粒pBV220-PON1,转化大肠杆菌,获得表达菌株.结果:rhPON1重组蛋白以不溶形式存在于包涵体中.凝胶扫描分析表明,重组蛋白表达量约占菌体总蛋白的18%.包涵体经分离、变性、复性等步骤处理后,产物未显示酶活性.结论:原核表达的rhPON1以包涵体形式存在,实现了人PON1在大肠杆菌中的高效表达.
目的:應用大腸桿菌原覈錶達繫統高效錶達人血清Q型對氧燐酶(PON1).方法:從pBlueScript-PON1重組質粒中通過PCR擴增得到瞭人PON1基因,將其亞剋隆至原覈錶達載體pBV220中,構建瞭重組錶達質粒pBV220-PON1,轉化大腸桿菌,穫得錶達菌株.結果:rhPON1重組蛋白以不溶形式存在于包涵體中.凝膠掃描分析錶明,重組蛋白錶達量約佔菌體總蛋白的18%.包涵體經分離、變性、複性等步驟處理後,產物未顯示酶活性.結論:原覈錶達的rhPON1以包涵體形式存在,實現瞭人PON1在大腸桿菌中的高效錶達.
목적:응용대장간균원핵표체계통고효표체인혈청Q형대양린매(PON1).방법:종pBlueScript-PON1중조질립중통과PCR확증득도료인PON1기인,장기아극륭지원핵표체재체pBV220중,구건료중조표체질립pBV220-PON1,전화대장간균,획득표체균주.결과:rhPON1중조단백이불용형식존재우포함체중.응효소묘분석표명,중조단백표체량약점균체총단백적18%.포함체경분리、변성、복성등보취처리후,산물미현시매활성.결론:원핵표체적rhPON1이포함체형식존재,실현료인PON1재대장간균중적고효표체.
