重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2010年
5期
513-515,封2-封3
,共4页
柳湘洁%宋彩霞%张群声%王启全
柳湘潔%宋綵霞%張群聲%王啟全
류상길%송채하%장군성%왕계전
胰腺肿瘤%Slug%RNA干扰%转染%肿瘤转移
胰腺腫瘤%Slug%RNA榦擾%轉染%腫瘤轉移
이선종류%Slug%RNA간우%전염%종류전이
目的 探讨RNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移的抑制作用.方法 用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA (pSlug-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA (pNeg-siRNA)导入PANC-1 细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆.观察siRNA-Slug对Slug表达的沉默及对胰腺癌细胞体外侵袭转移的抑制作用,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测不同处理组细胞中Slug mRNA 的表达水平,Western-blot测定蛋白表达水平.建立不同组裸鼠原位胰腺癌模型,观察Slug沉默对裸鼠原位胰腺癌转移的抑制作用.结果 pSlug-siRNA组细胞内Slug mRNA及Slug蛋白的表达被有效沉默.重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pSlug-siRNA组、空白对照组、pNeg-siRNA组穿透基底膜细胞数分别为(35±10)、(228±71)、(219±72)个/高倍镜(×200),pSlug-siRNA组明显低于空白对照组和pNeg-siRNA组,差异分别有统计学意义(P<0.05).裸鼠体内实验表明,pSlug-siRNA组的肿瘤转移结节、肝脏转移结节、腹水明显减少.结论 RNA干扰Slug基因表达对胰腺癌细胞侵袭转移有抑制作用,Slug可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点.
目的 探討RNA榦擾Slug基因錶達對胰腺癌轉移的抑製作用.方法 用脂質體轉染法將錶達siRNA-Slug的真覈錶達載體pGenesil-1-Slug-siRNA (pSlug-siRNA)和空載體pGenesil-1-Neg-siRNA (pNeg-siRNA)導入PANC-1 細胞,G418篩選暘性細胞,穫得穩定轉染的暘性剋隆.觀察siRNA-Slug對Slug錶達的沉默及對胰腺癌細胞體外侵襲轉移的抑製作用,採用實時熒光定量聚閤酶鏈反應(RT-PCR)技術檢測不同處理組細胞中Slug mRNA 的錶達水平,Western-blot測定蛋白錶達水平.建立不同組裸鼠原位胰腺癌模型,觀察Slug沉默對裸鼠原位胰腺癌轉移的抑製作用.結果 pSlug-siRNA組細胞內Slug mRNA及Slug蛋白的錶達被有效沉默.重組細胞基底膜(Matrigel)侵襲實驗顯示,pSlug-siRNA組、空白對照組、pNeg-siRNA組穿透基底膜細胞數分彆為(35±10)、(228±71)、(219±72)箇/高倍鏡(×200),pSlug-siRNA組明顯低于空白對照組和pNeg-siRNA組,差異分彆有統計學意義(P<0.05).裸鼠體內實驗錶明,pSlug-siRNA組的腫瘤轉移結節、肝髒轉移結節、腹水明顯減少.結論 RNA榦擾Slug基因錶達對胰腺癌細胞侵襲轉移有抑製作用,Slug可能成為胰腺癌基因治療的新靶點.
목적 탐토RNA간우Slug기인표체대이선암전이적억제작용.방법 용지질체전염법장표체siRNA-Slug적진핵표체재체pGenesil-1-Slug-siRNA (pSlug-siRNA)화공재체pGenesil-1-Neg-siRNA (pNeg-siRNA)도입PANC-1 세포,G418사선양성세포,획득은정전염적양성극륭.관찰siRNA-Slug대Slug표체적침묵급대이선암세포체외침습전이적억제작용,채용실시형광정량취합매련반응(RT-PCR)기술검측불동처리조세포중Slug mRNA 적표체수평,Western-blot측정단백표체수평.건립불동조라서원위이선암모형,관찰Slug침묵대라서원위이선암전이적억제작용.결과 pSlug-siRNA조세포내Slug mRNA급Slug단백적표체피유효침묵.중조세포기저막(Matrigel)침습실험현시,pSlug-siRNA조、공백대조조、pNeg-siRNA조천투기저막세포수분별위(35±10)、(228±71)、(219±72)개/고배경(×200),pSlug-siRNA조명현저우공백대조조화pNeg-siRNA조,차이분별유통계학의의(P<0.05).라서체내실험표명,pSlug-siRNA조적종류전이결절、간장전이결절、복수명현감소.결론 RNA간우Slug기인표체대이선암세포침습전이유억제작용,Slug가능성위이선암기인치료적신파점.