上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2011年
2期
37-42
,共6页
宋维%李善爽%杨桂华%赵凌侠
宋維%李善爽%楊桂華%趙凌俠
송유%리선상%양계화%조릉협
诺如病毒%P粒子%原核表达系统%亚基疫苗
諾如病毒%P粒子%原覈錶達繫統%亞基疫苗
낙여병독%P입자%원핵표체계통%아기역묘
为了研制番茄口服疫苗,按番茄偏爱密码子设计合成了编码诺如病毒(Norovirus,NVs)VA387毒株P粒子(P particles)基因PGENE(1039 bp),并在该基因5′端添加了编码His-tag(6×His)的DNA序列.将构建的原核表达载体pMAL-c2-PGENE导入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3 free),用1 mmol/L的IPTG(Isopropyl β-D-l-thiogalactopyranoside)诱导P粒子在BL21(E.coli)中表达.依据SDS-PAGE胶检测结果,对诱导温度(37℃)和时间(6 h)进行了优化,用Western blot技术证实了重组P粒子特异性和免疫活性,为研制番茄口服NVs(VA387)亚基疫苗-P粒子做了必要的准备.
為瞭研製番茄口服疫苗,按番茄偏愛密碼子設計閤成瞭編碼諾如病毒(Norovirus,NVs)VA387毒株P粒子(P particles)基因PGENE(1039 bp),併在該基因5′耑添加瞭編碼His-tag(6×His)的DNA序列.將構建的原覈錶達載體pMAL-c2-PGENE導入大腸桿菌(Escherichia coli)BL21(DE3 free),用1 mmol/L的IPTG(Isopropyl β-D-l-thiogalactopyranoside)誘導P粒子在BL21(E.coli)中錶達.依據SDS-PAGE膠檢測結果,對誘導溫度(37℃)和時間(6 h)進行瞭優化,用Western blot技術證實瞭重組P粒子特異性和免疫活性,為研製番茄口服NVs(VA387)亞基疫苗-P粒子做瞭必要的準備.
위료연제번가구복역묘,안번가편애밀마자설계합성료편마낙여병독(Norovirus,NVs)VA387독주P입자(P particles)기인PGENE(1039 bp),병재해기인5′단첨가료편마His-tag(6×His)적DNA서렬.장구건적원핵표체재체pMAL-c2-PGENE도입대장간균(Escherichia coli)BL21(DE3 free),용1 mmol/L적IPTG(Isopropyl β-D-l-thiogalactopyranoside)유도P입자재BL21(E.coli)중표체.의거SDS-PAGE효검측결과,대유도온도(37℃)화시간(6 h)진행료우화,용Western blot기술증실료중조P입자특이성화면역활성,위연제번가구복NVs(VA387)아기역묘-P입자주료필요적준비.
