中国生物医学工程学报
中國生物醫學工程學報
중국생물의학공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOMEDICAL ENGINEERING
2012年
2期
285-290
,共6页
恶性疟原虫%蛋白疫苗%大肠杆菌%表达%纯化
噁性瘧原蟲%蛋白疫苗%大腸桿菌%錶達%純化
악성학원충%단백역묘%대장간균%표체%순화
在大肠杆菌中表达和纯化恶性疟原虫随机重组多表位蛋白疫苗M.RCAg-1,将目的蛋白纯度最高化,回收率最大化.从工程菌BL21( DE3)-M.RCAg-1/pDS-eX提取重组质粒进行测序验证,用IPTG诱导表达,分别采用Ni亲和纯化,阴离子交换层析和凝胶过滤层析等不同组合方式的5种纯化方案进行纯化,根据最终纯度和回收率选择最佳纯化方案.Ni-NTA Agarose特异性好,一步纯化后M.RCAg-1纯度可达79.98％,后续的两步阴离子交换和分子筛纯化能显著提高M.RCAg-1的纯度,最终纯度可超过99％,回收率大于15％.试验确立了恶性疟原虫多表位蛋白疫苗M.RCAg-I在大肠杆菌中的表达和纯化方案,为下游放大生产和进一步研究M.RCAg-1的效果奠定了基础.
在大腸桿菌中錶達和純化噁性瘧原蟲隨機重組多錶位蛋白疫苗M.RCAg-1,將目的蛋白純度最高化,迴收率最大化.從工程菌BL21( DE3)-M.RCAg-1/pDS-eX提取重組質粒進行測序驗證,用IPTG誘導錶達,分彆採用Ni親和純化,陰離子交換層析和凝膠過濾層析等不同組閤方式的5種純化方案進行純化,根據最終純度和迴收率選擇最佳純化方案.Ni-NTA Agarose特異性好,一步純化後M.RCAg-1純度可達79.98％,後續的兩步陰離子交換和分子篩純化能顯著提高M.RCAg-1的純度,最終純度可超過99％,迴收率大于15％.試驗確立瞭噁性瘧原蟲多錶位蛋白疫苗M.RCAg-I在大腸桿菌中的錶達和純化方案,為下遊放大生產和進一步研究M.RCAg-1的效果奠定瞭基礎.
재대장간균중표체화순화악성학원충수궤중조다표위단백역묘M.RCAg-1,장목적단백순도최고화,회수솔최대화.종공정균BL21( DE3)-M.RCAg-1/pDS-eX제취중조질립진행측서험증,용IPTG유도표체,분별채용Ni친화순화,음리자교환층석화응효과려층석등불동조합방식적5충순화방안진행순화,근거최종순도화회수솔선택최가순화방안.Ni-NTA Agarose특이성호,일보순화후M.RCAg-1순도가체79.98％,후속적량보음리자교환화분자사순화능현저제고M.RCAg-1적순도,최종순도가초과99％,회수솔대우15％.시험학립료악성학원충다표위단백역묘M.RCAg-I재대장간균중적표체화순화방안,위하유방대생산화진일보연구M.RCAg-1적효과전정료기출.
