中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2011年
8期
599-602
,共4页
王新红%孟祥伟%孙逊%杜雅菊%赵晶%范玉晶
王新紅%孟祥偉%孫遜%杜雅菊%趙晶%範玉晶
왕신홍%맹상위%손손%두아국%조정%범옥정
癌,肝细胞%核糖核苷酸类%信号传导%细胞凋亡%热休克蛋白质类%β-连环素
癌,肝細胞%覈糖覈苷痠類%信號傳導%細胞凋亡%熱休剋蛋白質類%β-連環素
암,간세포%핵당핵감산류%신호전도%세포조망%열휴극단백질류%β-련배소
Carcinoma,hepatocellular%Ribonucleosides%Signal transduction%Apoptosis%Heat-shock proteins%β-catenin
目的 研究肝细胞癌中Wnt/β-连环素信号传导通路与caspase-3、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、葡萄糖调节蛋白78(Grp-78)、热休克蛋白(HSP)27的关系及其意义.方法 用RNAi技术将针对β-连环素的siRNA转染入肝癌HepG2细胞中沉默β-连环素基因表达,于72、96h提取蛋白质,用Western blot法检测β-连环素、caspase-3、XIAP、Grp-78、HSP27蛋白质的表达.用方差分析的方法进行统计学分析.结果 对照组、转染72h组、转染96h组β-连环素蛋白质表达的灰度值分别为18.9、1.5和3.2 ; β-肌动蛋白表达的灰度值分别为41.1、45.6和47.8 ;caspase-3蛋白质表达的灰度值分别为49.8、5.2和45.1 ; p-caspase-3蛋白质表达的灰度值分别为16.0、67.7和16.3 ; XIAP蛋白质表达的灰度值分别为28.2、21.9和49.9 ; Grp-78蛋白质表达的灰度值分别为23.3、49.9和26.8 ; HSP27蛋白质表达的灰度值分别为29.6、34.8和35.6 ; β-肌动蛋白表达的灰度值分别为32.1、33.6和34.2.针对β-连环素的siRNA转染肝癌HepG2细胞72h和96h均可抑制β-连环素蛋白质的表达(F=160.72,P＜0.01),而96h比72h的表达略有增加,差异有统计学意义.caspase-3的蛋白质表达于72 h被抑制,96h升高恢复至原有水平(F=136.10,P＜0.01);而p-caspase-3的蛋白质表达于72h增加,96h减少至原有水平(F=98.65,P＜0.01).XIAP的蛋白质表达于72 h被抑制,96h表达升高(F=37.29,P＜0.01).Grp-78的蛋白质表达于72 h增加,96h减少至原有水平(F=58.72,P＜0.01).HSP27的蛋白质表达转染前后一致,差异无统计学意义.结论 HepG2细胞中,Wnt/β-连环素信号传导通路与caspase-3、XIAP、Grp-78蛋白质的表达有关,而与HSP27的蛋白质表达无关.Wnt/β-连环素信号传导通路正是通过调节这些因子参与HepG2细胞凋亡及增殖、分化等调节.
目的 研究肝細胞癌中Wnt/β-連環素信號傳導通路與caspase-3、X連鎖凋亡抑製蛋白(XIAP)、葡萄糖調節蛋白78(Grp-78)、熱休剋蛋白(HSP)27的關繫及其意義.方法 用RNAi技術將針對β-連環素的siRNA轉染入肝癌HepG2細胞中沉默β-連環素基因錶達,于72、96h提取蛋白質,用Western blot法檢測β-連環素、caspase-3、XIAP、Grp-78、HSP27蛋白質的錶達.用方差分析的方法進行統計學分析.結果 對照組、轉染72h組、轉染96h組β-連環素蛋白質錶達的灰度值分彆為18.9、1.5和3.2 ; β-肌動蛋白錶達的灰度值分彆為41.1、45.6和47.8 ;caspase-3蛋白質錶達的灰度值分彆為49.8、5.2和45.1 ; p-caspase-3蛋白質錶達的灰度值分彆為16.0、67.7和16.3 ; XIAP蛋白質錶達的灰度值分彆為28.2、21.9和49.9 ; Grp-78蛋白質錶達的灰度值分彆為23.3、49.9和26.8 ; HSP27蛋白質錶達的灰度值分彆為29.6、34.8和35.6 ; β-肌動蛋白錶達的灰度值分彆為32.1、33.6和34.2.針對β-連環素的siRNA轉染肝癌HepG2細胞72h和96h均可抑製β-連環素蛋白質的錶達(F=160.72,P＜0.01),而96h比72h的錶達略有增加,差異有統計學意義.caspase-3的蛋白質錶達于72 h被抑製,96h升高恢複至原有水平(F=136.10,P＜0.01);而p-caspase-3的蛋白質錶達于72h增加,96h減少至原有水平(F=98.65,P＜0.01).XIAP的蛋白質錶達于72 h被抑製,96h錶達升高(F=37.29,P＜0.01).Grp-78的蛋白質錶達于72 h增加,96h減少至原有水平(F=58.72,P＜0.01).HSP27的蛋白質錶達轉染前後一緻,差異無統計學意義.結論 HepG2細胞中,Wnt/β-連環素信號傳導通路與caspase-3、XIAP、Grp-78蛋白質的錶達有關,而與HSP27的蛋白質錶達無關.Wnt/β-連環素信號傳導通路正是通過調節這些因子參與HepG2細胞凋亡及增殖、分化等調節.
목적 연구간세포암중Wnt/β-련배소신호전도통로여caspase-3、X련쇄조망억제단백(XIAP)、포도당조절단백78(Grp-78)、열휴극단백(HSP)27적관계급기의의.방법 용RNAi기술장침대β-련배소적siRNA전염입간암HepG2세포중침묵β-련배소기인표체,우72、96h제취단백질,용Western blot법검측β-련배소、caspase-3、XIAP、Grp-78、HSP27단백질적표체.용방차분석적방법진행통계학분석.결과 대조조、전염72h조、전염96h조β-련배소단백질표체적회도치분별위18.9、1.5화3.2 ; β-기동단백표체적회도치분별위41.1、45.6화47.8 ;caspase-3단백질표체적회도치분별위49.8、5.2화45.1 ; p-caspase-3단백질표체적회도치분별위16.0、67.7화16.3 ; XIAP단백질표체적회도치분별위28.2、21.9화49.9 ; Grp-78단백질표체적회도치분별위23.3、49.9화26.8 ; HSP27단백질표체적회도치분별위29.6、34.8화35.6 ; β-기동단백표체적회도치분별위32.1、33.6화34.2.침대β-련배소적siRNA전염간암HepG2세포72h화96h균가억제β-련배소단백질적표체(F=160.72,P＜0.01),이96h비72h적표체략유증가,차이유통계학의의.caspase-3적단백질표체우72 h피억제,96h승고회복지원유수평(F=136.10,P＜0.01);이p-caspase-3적단백질표체우72h증가,96h감소지원유수평(F=98.65,P＜0.01).XIAP적단백질표체우72 h피억제,96h표체승고(F=37.29,P＜0.01).Grp-78적단백질표체우72 h증가,96h감소지원유수평(F=58.72,P＜0.01).HSP27적단백질표체전염전후일치,차이무통계학의의.결론 HepG2세포중,Wnt/β-련배소신호전도통로여caspase-3、XIAP、Grp-78단백질적표체유관,이여HSP27적단백질표체무관.Wnt/β-련배소신호전도통로정시통과조절저사인자삼여HepG2세포조망급증식、분화등조절.
Objective To investigate the relationship and significance of Wnt/β-catenin signaling pathway with caspase-3, XIAP, HSP27and Grp-78. Methods The HCC cell line HepG2 was transfected with small interfering RNA (siRNA) directed against β-catenin. After 72 and 96 h, protein was extracted and the protein expressions of β-catenin, caspase-3, XIAP, Grp-78 and HSP27 were detected by Western blot. Results β-catenin protein expression was inhibited at both time points and the expression at 96 h was higher than that at 72 h (F = 160.72, P ＜ 0.01). Interestingly, Caspase-3 protein expression was decreased at 72 h and increased to normal at 96 h (F = 136.10, P ＜ 0.01), while p-caspase-3 protein expression increased at 72 h and decreased to normal at 96 h (F= 98.65, P ＜ 0.01). XIAP protein expression decreased at 72 h (F= 37.29, P ＜ 0.01)and increased at 96 h. Grp-78 protein expression increased at 72 h and decreased to normal at 96 h (F = 58.72, P ＜ 0.01). HSP27 protein expression showed no change following transfection (F = 1.91, P ＞ 0.05). Conclusions Wnt/β-catenin signaling pathway is related to the protein expressions of caspase-3, XIAP and Grp-78, but not related to HSP27 protein expression in HCC. Wnt/β-catenin signaling pathway may participate in the regulation of HCC apoptosis, proliferation and differentiation through affecting these factors.
