生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2004年
3期
450-455
,共6页
刘如石%何志强%李少伟%杨坤宇%鲜阳凌%逄淑强%张军%李益民%夏宁邵
劉如石%何誌彊%李少偉%楊坤宇%鮮暘凌%逄淑彊%張軍%李益民%夏寧邵
류여석%하지강%리소위%양곤우%선양릉%방숙강%장군%리익민%하저소
戊型肝炎病毒%衣壳蛋白%重组大肠杆菌%高密度培养
戊型肝炎病毒%衣殼蛋白%重組大腸桿菌%高密度培養
무형간염병독%의각단백%중조대장간균%고밀도배양
在10L发酵罐中对戊型肝炎病毒衣壳蛋白在重组大肠杆菌中表达发酵工艺进行了研究,用分批培养方法探讨了不同培养基、培养基中磷酸盐浓度和Mg2+浓度等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响;用分批补料培养研究了不同的补料工艺对菌体生长与重组蛋白表达的影响,同时对重组菌诱导时期、诱导持续时间以及不同诱导温度表达包含体在尿素溶液中的溶解性进行了研究.结果表明,在优化后的培养基中,磷酸盐浓度、Mg2+浓度分别为80mmol/L与20mmol/L时菌体生长与表达效果较好;分批补料培养中,37℃培养9h菌体达到对数期中期(约45OD600)为适宜诱导时期,加入终浓度为1.0mmol/L IPTG后诱导5h,OD600达到80以上,重组蛋白表达量达到29.74%,为最适收获菌体时间;37℃表达的包含体80%以上溶解在4mol/L的尿素溶液中,最终浓度达到14mg/mL;10L发酵罐中确定的发酵工艺参数在30L发酵罐中进行了放大培养,10L发酵罐中确定的发酵工艺参数在30L发酵罐上具有可放大性与重复性,可以应用于工业生产.
在10L髮酵罐中對戊型肝炎病毒衣殼蛋白在重組大腸桿菌中錶達髮酵工藝進行瞭研究,用分批培養方法探討瞭不同培養基、培養基中燐痠鹽濃度和Mg2+濃度等因素對菌體生長與重組蛋白錶達的影響;用分批補料培養研究瞭不同的補料工藝對菌體生長與重組蛋白錶達的影響,同時對重組菌誘導時期、誘導持續時間以及不同誘導溫度錶達包含體在尿素溶液中的溶解性進行瞭研究.結果錶明,在優化後的培養基中,燐痠鹽濃度、Mg2+濃度分彆為80mmol/L與20mmol/L時菌體生長與錶達效果較好;分批補料培養中,37℃培養9h菌體達到對數期中期(約45OD600)為適宜誘導時期,加入終濃度為1.0mmol/L IPTG後誘導5h,OD600達到80以上,重組蛋白錶達量達到29.74%,為最適收穫菌體時間;37℃錶達的包含體80%以上溶解在4mol/L的尿素溶液中,最終濃度達到14mg/mL;10L髮酵罐中確定的髮酵工藝參數在30L髮酵罐中進行瞭放大培養,10L髮酵罐中確定的髮酵工藝參數在30L髮酵罐上具有可放大性與重複性,可以應用于工業生產.
재10L발효관중대무형간염병독의각단백재중조대장간균중표체발효공예진행료연구,용분비배양방법탐토료불동배양기、배양기중린산염농도화Mg2+농도등인소대균체생장여중조단백표체적영향;용분비보료배양연구료불동적보료공예대균체생장여중조단백표체적영향,동시대중조균유도시기、유도지속시간이급불동유도온도표체포함체재뇨소용액중적용해성진행료연구.결과표명,재우화후적배양기중,린산염농도、Mg2+농도분별위80mmol/L여20mmol/L시균체생장여표체효과교호;분비보료배양중,37℃배양9h균체체도대수기중기(약45OD600)위괄의유도시기,가입종농도위1.0mmol/L IPTG후유도5h,OD600체도80이상,중조단백표체량체도29.74%,위최괄수획균체시간;37℃표체적포함체80%이상용해재4mol/L적뇨소용액중,최종농도체도14mg/mL;10L발효관중학정적발효공예삼수재30L발효관중진행료방대배양,10L발효관중학정적발효공예삼수재30L발효관상구유가방대성여중복성,가이응용우공업생산.
