中国临床康复
中國臨床康複
중국림상강복
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATION
2005年
29期
53-55
,共3页
脊髓损伤%免疫%主动%模型%动物%神经行为学表现
脊髓損傷%免疫%主動%模型%動物%神經行為學錶現
척수손상%면역%주동%모형%동물%신경행위학표현
目的:应用不同主动免疫方法建立不同节段大鼠脊髓损伤自身免疫神经保护动物模型,并以其行为学变化加以评估验证.方法:实验于2004-06/09在河北医科大学附属第二医院实验中心进行.①实验动物选择:取近交成年雌性SD大鼠75只,随机分为5组,髓鞘碱性蛋白免疫组;全脊髓匀浆免疫组;卵白蛋白免疫组;假手术组;单纯损伤组,每组15只.豚鼠5只用于全脊髓匀浆制备.髓鞘碱性蛋白、卵白蛋白(均为Sigma).②模型建立:除假手术组以外,按Gruner改良法制作T7或T9脊髓背侧损伤模型,打击强度为25势能克厘米(gcf),假手术组仅行椎板切除术.③主动免疫:在损伤前1周,髓鞘碱性蛋白免疫组,皮下注射髓鞘碱性蛋白100μg/只;全脊髓匀浆免疫组,皮下注射全脊髓匀浆300μg/只;卵白蛋白免疫组,皮下注射卵白蛋白200μg/只.假手术组亦用髓鞘碱性蛋白100μg/只.损伤后即刻免疫,各组抗原剂量、种类同前者,但行腹腔注射.单纯损伤组,不做主动免疫.④大鼠行为学评估标准:分别在术后1,7,14,21,28 d进行斜板试验角度测评;开阔地运动评分(观察大鼠后肢运动、关节活动、步态稳定性,爪、尾巴的位置等,时间为4 min.0～21分标准,分值高为功能好,低为差);网格试验和平衡试验.结果:实验用75只大鼠均进入结果分析.①大鼠不同胸段脊髓损伤的开阔地运动评分:伤后7 d,T7损伤大鼠评分明显低于T9损伤大鼠(1.5比4.2分,t=22.71,P＜0.05);28 d时,两者比较差异更显著,(2.9比8.2分,t=19.18,P＜0.01).②免疫组大鼠斜板实验角度:脊髓损伤后28 d,髓鞘碱性蛋白和全脊髓匀浆免疫组均显著大于卵白蛋白组(65°,60°比35°,P＜0.01).③各组脊髓损伤后不同时间开阔地运动评分:免疫组明显高于卵白蛋白组(14.5,13.0比8.0分,P＜0.01).④网格试验和平衡试验:各组评分结果与开阔地运动评分结果一致.结论:不同节段脊髓损伤时应用不同主动免疫方法建立的动物模型表明:①脊髓损伤的节段越低,恢复的效果越好.②髓鞘碱性蛋白或全脊髓匀浆主动免疫可促进大鼠脊髓损伤后神经功能康复,卵白蛋白为异体蛋白,非自身抗原,则无此作用.
目的:應用不同主動免疫方法建立不同節段大鼠脊髓損傷自身免疫神經保護動物模型,併以其行為學變化加以評估驗證.方法:實驗于2004-06/09在河北醫科大學附屬第二醫院實驗中心進行.①實驗動物選擇:取近交成年雌性SD大鼠75隻,隨機分為5組,髓鞘堿性蛋白免疫組;全脊髓勻漿免疫組;卵白蛋白免疫組;假手術組;單純損傷組,每組15隻.豚鼠5隻用于全脊髓勻漿製備.髓鞘堿性蛋白、卵白蛋白(均為Sigma).②模型建立:除假手術組以外,按Gruner改良法製作T7或T9脊髓揹側損傷模型,打擊彊度為25勢能剋釐米(gcf),假手術組僅行椎闆切除術.③主動免疫:在損傷前1週,髓鞘堿性蛋白免疫組,皮下註射髓鞘堿性蛋白100μg/隻;全脊髓勻漿免疫組,皮下註射全脊髓勻漿300μg/隻;卵白蛋白免疫組,皮下註射卵白蛋白200μg/隻.假手術組亦用髓鞘堿性蛋白100μg/隻.損傷後即刻免疫,各組抗原劑量、種類同前者,但行腹腔註射.單純損傷組,不做主動免疫.④大鼠行為學評估標準:分彆在術後1,7,14,21,28 d進行斜闆試驗角度測評;開闊地運動評分(觀察大鼠後肢運動、關節活動、步態穩定性,爪、尾巴的位置等,時間為4 min.0～21分標準,分值高為功能好,低為差);網格試驗和平衡試驗.結果:實驗用75隻大鼠均進入結果分析.①大鼠不同胸段脊髓損傷的開闊地運動評分:傷後7 d,T7損傷大鼠評分明顯低于T9損傷大鼠(1.5比4.2分,t=22.71,P＜0.05);28 d時,兩者比較差異更顯著,(2.9比8.2分,t=19.18,P＜0.01).②免疫組大鼠斜闆實驗角度:脊髓損傷後28 d,髓鞘堿性蛋白和全脊髓勻漿免疫組均顯著大于卵白蛋白組(65°,60°比35°,P＜0.01).③各組脊髓損傷後不同時間開闊地運動評分:免疫組明顯高于卵白蛋白組(14.5,13.0比8.0分,P＜0.01).④網格試驗和平衡試驗:各組評分結果與開闊地運動評分結果一緻.結論:不同節段脊髓損傷時應用不同主動免疫方法建立的動物模型錶明:①脊髓損傷的節段越低,恢複的效果越好.②髓鞘堿性蛋白或全脊髓勻漿主動免疫可促進大鼠脊髓損傷後神經功能康複,卵白蛋白為異體蛋白,非自身抗原,則無此作用.
목적:응용불동주동면역방법건립불동절단대서척수손상자신면역신경보호동물모형,병이기행위학변화가이평고험증.방법:실험우2004-06/09재하북의과대학부속제이의원실험중심진행.①실험동물선택:취근교성년자성SD대서75지,수궤분위5조,수초감성단백면역조;전척수균장면역조;란백단백면역조;가수술조;단순손상조,매조15지.돈서5지용우전척수균장제비.수초감성단백、란백단백(균위Sigma).②모형건립:제가수술조이외,안Gruner개량법제작T7혹T9척수배측손상모형,타격강도위25세능극전미(gcf),가수술조부행추판절제술.③주동면역:재손상전1주,수초감성단백면역조,피하주사수초감성단백100μg/지;전척수균장면역조,피하주사전척수균장300μg/지;란백단백면역조,피하주사란백단백200μg/지.가수술조역용수초감성단백100μg/지.손상후즉각면역,각조항원제량、충류동전자,단행복강주사.단순손상조,불주주동면역.④대서행위학평고표준:분별재술후1,7,14,21,28 d진행사판시험각도측평;개활지운동평분(관찰대서후지운동、관절활동、보태은정성,조、미파적위치등,시간위4 min.0～21분표준,분치고위공능호,저위차);망격시험화평형시험.결과:실험용75지대서균진입결과분석.①대서불동흉단척수손상적개활지운동평분:상후7 d,T7손상대서평분명현저우T9손상대서(1.5비4.2분,t=22.71,P＜0.05);28 d시,량자비교차이경현저,(2.9비8.2분,t=19.18,P＜0.01).②면역조대서사판실험각도:척수손상후28 d,수초감성단백화전척수균장면역조균현저대우란백단백조(65°,60°비35°,P＜0.01).③각조척수손상후불동시간개활지운동평분:면역조명현고우란백단백조(14.5,13.0비8.0분,P＜0.01).④망격시험화평형시험:각조평분결과여개활지운동평분결과일치.결론:불동절단척수손상시응용불동주동면역방법건립적동물모형표명:①척수손상적절단월저,회복적효과월호.②수초감성단백혹전척수균장주동면역가촉진대서척수손상후신경공능강복,란백단백위이체단백,비자신항원,칙무차작용.
