南京医科大学学报（自然科学版）
南京醫科大學學報（自然科學版）
남경의과대학학보（자연과학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2007年
5期
452-456
,共5页
潘梅%魏钦俊%朱义保%曹芳%曹新
潘梅%魏欽俊%硃義保%曹芳%曹新
반매%위흠준%주의보%조방%조신
人催乳素受体%反义RNA%乳腺癌%MCF-7
人催乳素受體%反義RNA%乳腺癌%MCF-7
인최유소수체%반의RNA%유선암%MCF-7
目的:构建表达人催乳素受体基因(prolactin receptor,PRLR)反义RNA的真核表达质粒,观察其对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响.方法:应用基因重组技术,将人PRLR的cDNA反向克隆至pcDAN3.1(-)载体中,构建PRLR反义RNA真核表达质粒,将其转染人人乳腺癌细胞系MCF-7中,经G418筛选得到稳定细胞克隆,利用荧光定量PCR检测转染后细胞PRLR基因表达量的变化,应用MTT法、平板克隆形成实验及流式细胞术评价转染后细胞的增殖情况.结果:成功构建出能够表达PRLR反义RNA的真核表达质粒,转染该质粒后,MCF-7中PRLR基因表达量下降,细胞生长变慢,克隆形成能力降低,G1期细胞增加,S期细胞减少.结论:PRLR反义RNA能够下调该基因的表达,并且抑制乳腺癌细胞的增殖,证明反义基因干预治疗的可能性,为乳腺癌基因治疗的进一步研究提供了必要的依据.
目的:構建錶達人催乳素受體基因(prolactin receptor,PRLR)反義RNA的真覈錶達質粒,觀察其對乳腺癌細胞MCF-7增殖的影響.方法:應用基因重組技術,將人PRLR的cDNA反嚮剋隆至pcDAN3.1(-)載體中,構建PRLR反義RNA真覈錶達質粒,將其轉染人人乳腺癌細胞繫MCF-7中,經G418篩選得到穩定細胞剋隆,利用熒光定量PCR檢測轉染後細胞PRLR基因錶達量的變化,應用MTT法、平闆剋隆形成實驗及流式細胞術評價轉染後細胞的增殖情況.結果:成功構建齣能夠錶達PRLR反義RNA的真覈錶達質粒,轉染該質粒後,MCF-7中PRLR基因錶達量下降,細胞生長變慢,剋隆形成能力降低,G1期細胞增加,S期細胞減少.結論:PRLR反義RNA能夠下調該基因的錶達,併且抑製乳腺癌細胞的增殖,證明反義基因榦預治療的可能性,為乳腺癌基因治療的進一步研究提供瞭必要的依據.
목적:구건표체인최유소수체기인(prolactin receptor,PRLR)반의RNA적진핵표체질립,관찰기대유선암세포MCF-7증식적영향.방법:응용기인중조기술,장인PRLR적cDNA반향극륭지pcDAN3.1(-)재체중,구건PRLR반의RNA진핵표체질립,장기전염인인유선암세포계MCF-7중,경G418사선득도은정세포극륭,이용형광정량PCR검측전염후세포PRLR기인표체량적변화,응용MTT법、평판극륭형성실험급류식세포술평개전염후세포적증식정황.결과:성공구건출능구표체PRLR반의RNA적진핵표체질립,전염해질립후,MCF-7중PRLR기인표체량하강,세포생장변만,극륭형성능력강저,G1기세포증가,S기세포감소.결론:PRLR반의RNA능구하조해기인적표체,병차억제유선암세포적증식,증명반의기인간예치료적가능성,위유선암기인치료적진일보연구제공료필요적의거.
