细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
2期
123-125
,共3页
董博翰%王华%胡小平%房明丽%张永胜%张培因%王丽颖
董博翰%王華%鬍小平%房明麗%張永勝%張培因%王麗穎
동박한%왕화%호소평%방명려%장영성%장배인%왕려영
口蹄疫疫苗%重组蛋白%纯化%活性检测
口蹄疫疫苗%重組蛋白%純化%活性檢測
구제역역묘%중조단백%순화%활성검측
目的:利用原核表达系统诱导表达一种可以作为口蹄疫疫苗的重组蛋白J11-G,并对这种蛋白进行纯化以及活性检测.方法:对已经构建的表达载体PET28a-J11-G进行酶切鉴定,将鉴定后的重组载体PET28a-J11-G转化入大肠杆菌BL21,在BL21细菌细胞中诱导表达月的蛋白,用改良的镍亲和层析法纯化目的蛋白,以EIJSA检测纯化所得蛋白的活性.结果:长期冻存的重组载体PET28a-J11-G结构完整,其在大肠杆菌BL21中经1 mmol/L IPTG诱导后表达出相对分子质量(Mr)约为47 000的目的蛋白,经纯化后获得了产率和纯度均很高的重组蛋白J11-G,ELISA检测证明该蛋白活性良好.结论:成功地对重组蛋白J11-G进行了诱导表达,改良法有利于蛋白产率和纯度的提高,纯化蛋白具有较好的免疫活性.重组蛋白J11-G将可能成为一种抗口蹄疫疫苗.
目的:利用原覈錶達繫統誘導錶達一種可以作為口蹄疫疫苗的重組蛋白J11-G,併對這種蛋白進行純化以及活性檢測.方法:對已經構建的錶達載體PET28a-J11-G進行酶切鑒定,將鑒定後的重組載體PET28a-J11-G轉化入大腸桿菌BL21,在BL21細菌細胞中誘導錶達月的蛋白,用改良的鎳親和層析法純化目的蛋白,以EIJSA檢測純化所得蛋白的活性.結果:長期凍存的重組載體PET28a-J11-G結構完整,其在大腸桿菌BL21中經1 mmol/L IPTG誘導後錶達齣相對分子質量(Mr)約為47 000的目的蛋白,經純化後穫得瞭產率和純度均很高的重組蛋白J11-G,ELISA檢測證明該蛋白活性良好.結論:成功地對重組蛋白J11-G進行瞭誘導錶達,改良法有利于蛋白產率和純度的提高,純化蛋白具有較好的免疫活性.重組蛋白J11-G將可能成為一種抗口蹄疫疫苗.
목적:이용원핵표체계통유도표체일충가이작위구제역역묘적중조단백J11-G,병대저충단백진행순화이급활성검측.방법:대이경구건적표체재체PET28a-J11-G진행매절감정,장감정후적중조재체PET28a-J11-G전화입대장간균BL21,재BL21세균세포중유도표체월적단백,용개량적얼친화층석법순화목적단백,이EIJSA검측순화소득단백적활성.결과:장기동존적중조재체PET28a-J11-G결구완정,기재대장간균BL21중경1 mmol/L IPTG유도후표체출상대분자질량(Mr)약위47 000적목적단백,경순화후획득료산솔화순도균흔고적중조단백J11-G,ELISA검측증명해단백활성량호.결론:성공지대중조단백J11-G진행료유도표체,개량법유리우단백산솔화순도적제고,순화단백구유교호적면역활성.중조단백J11-G장가능성위일충항구제역역묘.
