中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2009年
2期
42-44
,共3页
周洁%陈义平%楚电峰%朱吕昌%罗飞%张秀娟
週潔%陳義平%楚電峰%硃呂昌%囉飛%張秀娟
주길%진의평%초전봉%주려창%라비%장수연
猪细小病毒%结构蛋白VP2%主要抗原表位%原核表达
豬細小病毒%結構蛋白VP2%主要抗原錶位%原覈錶達
저세소병독%결구단백VP2%주요항원표위%원핵표체
本丈参照GenBank发表的猪细小病毒结构蛋白VP2基因序列,设计一对引物,通过PCR方法扩增出一段包含VP2主要抗原表位编码区的片段,产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-VP2经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达.SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量为39.1KDa,主要以包涵体形式存在.BandScan分析,表达量约占菌体蛋白的65.2%.表达产物用His亲和层析柱纯化.Western blotting结果显示,该种蛋白能与阳性血清发生特异性反应.结果说明,该重组蛋白具有抗原性,可以作为鉴别诊断用抗原.
本丈參照GenBank髮錶的豬細小病毒結構蛋白VP2基因序列,設計一對引物,通過PCR方法擴增齣一段包含VP2主要抗原錶位編碼區的片段,產物剋隆到pGEM-T載體上,酶切後插入原覈錶達載體pET-32(a)的T7啟動子下遊,構建的重組質粒pET-VP2經IPTG誘導,在大腸桿菌BL21(DE3)中穫得瞭高效錶達.SDS-PAGE結果顯示,錶達產物分子量為39.1KDa,主要以包涵體形式存在.BandScan分析,錶達量約佔菌體蛋白的65.2%.錶達產物用His親和層析柱純化.Western blotting結果顯示,該種蛋白能與暘性血清髮生特異性反應.結果說明,該重組蛋白具有抗原性,可以作為鑒彆診斷用抗原.
본장삼조GenBank발표적저세소병독결구단백VP2기인서렬,설계일대인물,통과PCR방법확증출일단포함VP2주요항원표위편마구적편단,산물극륭도pGEM-T재체상,매절후삽입원핵표체재체pET-32(a)적T7계동자하유,구건적중조질립pET-VP2경IPTG유도,재대장간균BL21(DE3)중획득료고효표체.SDS-PAGE결과현시,표체산물분자량위39.1KDa,주요이포함체형식존재.BandScan분석,표체량약점균체단백적65.2%.표체산물용His친화층석주순화.Western blotting결과현시,해충단백능여양성혈청발생특이성반응.결과설명,해중조단백구유항원성,가이작위감별진단용항원.
