高等学校化学学报
高等學校化學學報
고등학교화학학보
CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES
2009年
3期
483-488
,共6页
田素燕%李连之%李海丽%薛泽春%杜为红
田素燕%李連之%李海麗%薛澤春%杜為紅
전소연%리련지%리해려%설택춘%두위홍
细胞红蛋白%分离纯化%谱学表征%稳定性
細胞紅蛋白%分離純化%譜學錶徵%穩定性
세포홍단백%분리순화%보학표정%은정성
以可溶性和包涵体两种形式表达纯化得到了重组人细胞红蛋白, 并比较了其谱学特征和热稳定性. 可溶性蛋白经硫酸铵分级沉淀, 再依次经Hiprep 16/10 Q FF阴离子交换柱, Hiload16/60 Superdex 75 凝胶过滤柱和 CM Sepharose FF 阳离子交换柱纯化, 得到电泳纯的包涵体蛋白;包涵体蛋白经盐酸胍变性溶解、外加血红素重组和柱层析得到了电泳纯的可溶性蛋白. 电喷雾质谱表明, 以这两种形式得到的蛋白分子量相差153.0, 紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和圆二色光谱均表明, 这两种形式的蛋白在血红素构象上存在差异, 其热稳定性也不相同.
以可溶性和包涵體兩種形式錶達純化得到瞭重組人細胞紅蛋白, 併比較瞭其譜學特徵和熱穩定性. 可溶性蛋白經硫痠銨分級沉澱, 再依次經Hiprep 16/10 Q FF陰離子交換柱, Hiload16/60 Superdex 75 凝膠過濾柱和 CM Sepharose FF 暘離子交換柱純化, 得到電泳純的包涵體蛋白;包涵體蛋白經鹽痠胍變性溶解、外加血紅素重組和柱層析得到瞭電泳純的可溶性蛋白. 電噴霧質譜錶明, 以這兩種形式得到的蛋白分子量相差153.0, 紫外-可見吸收光譜、熒光光譜和圓二色光譜均錶明, 這兩種形式的蛋白在血紅素構象上存在差異, 其熱穩定性也不相同.
이가용성화포함체량충형식표체순화득도료중조인세포홍단백, 병비교료기보학특정화열은정성. 가용성단백경류산안분급침정, 재의차경Hiprep 16/10 Q FF음리자교환주, Hiload16/60 Superdex 75 응효과려주화 CM Sepharose FF 양리자교환주순화, 득도전영순적포함체단백;포함체단백경염산고변성용해、외가혈홍소중조화주층석득도료전영순적가용성단백. 전분무질보표명, 이저량충형식득도적단백분자량상차153.0, 자외-가견흡수광보、형광광보화원이색광보균표명, 저량충형식적단백재혈홍소구상상존재차이, 기열은정성야불상동.
