重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2010年
16期
2100-2102
,共3页
邹志鹏%冯丽%许万福%邓凡
鄒誌鵬%馮麗%許萬福%鄧凡
추지붕%풍려%허만복%산범
蛋白激酶D3%尿激酶型纤溶酶原激活物受体%β-连环蛋白
蛋白激酶D3%尿激酶型纖溶酶原激活物受體%β-連環蛋白
단백격매D3%뇨격매형섬용매원격활물수체%β-련배단백
目的 研究蛋白激酶D 3(PKD3)对人胚肾上皮细胞系HEK293细胞中尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)表达水平的影响及其机制,以阐明PKD3调控uPAR表达的重要作用.方法 首先在HEK293细胞中过表达PKD3,并以佛波酯(PMA)刺激24 h,而后采用实时定量PCR扩增PKD3、uPAR cDNA,并使用2-△△Ct方法比较其相对表达量的变化.然后在HEK293细胞中转染β-连环蛋白野生型质粒,并以PMA刺激1 h,用免疫沉淀法检测PKD3与β-连环蛋白之间的相互作用.结果 在转染的HEK293细胞中PKD3过表达,而且过表达PKD3可明显上调PMA诱导的uPAR mRNA表达水平.同时在PMA刺激作用下,可明显增强HEK293细胞中PKD3与β-连环蛋白之间的相互作用.结论 PKD3可能通过与β-连环蛋白的相互作用上调uPAR表达.
目的 研究蛋白激酶D 3(PKD3)對人胚腎上皮細胞繫HEK293細胞中尿激酶型纖溶酶原激活物受體(uPAR)錶達水平的影響及其機製,以闡明PKD3調控uPAR錶達的重要作用.方法 首先在HEK293細胞中過錶達PKD3,併以彿波酯(PMA)刺激24 h,而後採用實時定量PCR擴增PKD3、uPAR cDNA,併使用2-△△Ct方法比較其相對錶達量的變化.然後在HEK293細胞中轉染β-連環蛋白野生型質粒,併以PMA刺激1 h,用免疫沉澱法檢測PKD3與β-連環蛋白之間的相互作用.結果 在轉染的HEK293細胞中PKD3過錶達,而且過錶達PKD3可明顯上調PMA誘導的uPAR mRNA錶達水平.同時在PMA刺激作用下,可明顯增彊HEK293細胞中PKD3與β-連環蛋白之間的相互作用.結論 PKD3可能通過與β-連環蛋白的相互作用上調uPAR錶達.
목적 연구단백격매D 3(PKD3)대인배신상피세포계HEK293세포중뇨격매형섬용매원격활물수체(uPAR)표체수평적영향급기궤제,이천명PKD3조공uPAR표체적중요작용.방법 수선재HEK293세포중과표체PKD3,병이불파지(PMA)자격24 h,이후채용실시정량PCR확증PKD3、uPAR cDNA,병사용2-△△Ct방법비교기상대표체량적변화.연후재HEK293세포중전염β-련배단백야생형질립,병이PMA자격1 h,용면역침정법검측PKD3여β-련배단백지간적상호작용.결과 재전염적HEK293세포중PKD3과표체,이차과표체PKD3가명현상조PMA유도적uPAR mRNA표체수평.동시재PMA자격작용하,가명현증강HEK293세포중PKD3여β-련배단백지간적상호작용.결론 PKD3가능통과여β-련배단백적상호작용상조uPAR표체.
